Summary
Her præsenterer vi en protokol for effektiv og hurtig elektroakupunktur (EA) hos mus eller unge rotter ved hjælp af en tredimensionel (3D) printet holder. Denne teknik tillader samtidig drift på flere dyr, hvilket sparer tid og øger eksperimentel effektivitet.
Abstract
Elektroakupunktur (EA) er meget udbredt til behandling af forskellige sundhedsmæssige forhold. Den underliggende mekanisme for EA-behandling er imidlertid fortsat uklar, hvilket hindrer dens fremme. Den mekanistiske undersøgelse kræver muse- eller rottemodeller for at løse dette problem. Disse dyr er imidlertid ikke lydige mod forsøgsprocessen, hvilket er tidskrævende. For at løse disse problemer designede vi en 3D-printet bulkfiksator til små dyr for at forbedre effektiviteten af EA's dyreforsøg. Denne video viser detaljeret, hvordan du bruger fixatoren til at udføre bulk EA på mus eller unge rotter. Til udvælgelse af akupunkter blev den forreste skrå linje af vertex temporal (MS6 hoved) og Tianshu punkt (ST25 mave) valgt for at verificere effekten af fikseringsanordningen med tilbøjelig positionering og liggende positionering. Brug af den 3D-printede holder til små dyr gør det muligt at immobilisere og behandle flere gnavere samtidigt, hvilket reducerer den tid og de ressourcer, der kræves til forsøget. Denne teknik kan anvendes på andre dyremodeller ved at 3D-printe forskellige størrelser og kan potentielt bruges til forskellige fastgørelsesforhold. Enheden er gavnlig for fremme af eksperimentel videnskabelig forskning i EA.
Introduction
Elektroakupunktur (EA) terapi er en unik metode, hvor akupunkturnåle indsættes i hovedbunden og forbindes til en elektromaskine for at stimulere specifikke punkter1. I modsætning til manuel stimulering tillader EA bedre kontrol over stimulering ved at stabilisere specifikke frekvenser og bølgeformer for at opnå optimale terapeutiske effekter2. Ifølge en undersøgelse bruger 81,2% af medicinske institutioner i Kina EA eller manuel akupunktur til behandling af cerebral parese, neuralgi, ansigtsparese og andre tilstande. På trods af sin popularitet er EA's specifikke virkningsmekanisme stadig ukendt, hvilket har hindret dets fremme og anvendelse i rehabiliteringsbehandling af neurologiske sygdomme 1,2,3. Der er behov for yderligere forskning for fuldt ud at forstå mekanismen bag EA's effektivitet og for at fremme dens anvendelse i rehabiliteringsbehandlingen af neurologiske sygdomme.
Da akupunkturens indflydelse udvides over hele verden, har mange undersøgelser allerede undersøgt mekanismerne for EA udført på gnavermodeller, såsom rotte- eller musemodeller 1,2,3. Der opstår ofte flere problemer i EA's gnavereksperimenter. Den første er, hvordan man immobiliserer gnavere uden anæstesi, da akupunktur udført på vågne emner afspejler mere klinisk praksis. Derudover kræver nogle forsøg, at dyrene er vågne for at observere behandlingseffekter 2,3. En anden udfordring er nøjagtigt at lokalisere akupunkterne hos mus eller rotter, der svarer til dem hos mennesker. Den præcise lokalisering af akupunkter i eksperimentelle gnavere undersøges i øjeblikket af mange forskere 4,5. I denne protokol blev MS6 og ST25 valgt, som er klart defineret hos gnavere ved transformation af human anatomisk lokalisering. MS6 er almindeligt anvendt til behandling af visse hjernesygdomme, såsom Parkinsons sygdom6. ST25 bruges normalt til behandling af gastrointestinale problemer, såsom diarré7. Disse to akupunkter blev primært valgt for at demonstrere, hvordan gnavere effektivt kan immobiliseres i både liggende og udsatte positioner. Desuden er disse akupunkter blevet grundigt undersøgt og giver betydelig indsigt til forskningsformål 6,7.
Den tidligere metode til immobilisering af en enkelt rotte til forsøg er ikke kun tidskrævende, men også vanskelig at håndtere af en enkelt person8. På grund af manglende samarbejde fra dyr er succesraten desuden relativt lav i praksis. Derfor er der et kritisk behov for at skabe en let etableret dyremodel med stabile egenskaber for at forbedre forsøgseffektiviteten. I denne artikel blev der introduceret en 3D-printet holder til små dyr, der let kunne immobilisere flere gnavere, hvilket førte til motorbegrænsning. Formålet med denne artikel er at administrere EA-behandlinger til et parti unge rotter eller mus med fokus på strategierne for bulkbegrænsning af mus, identifikation og stimulering af MS6- og ST25-akupunkter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Eksperimenterne i denne undersøgelse overholder "3R" -princippet om dyreetik og er godkendt af laboratoriedyrs velfærd og etnisk komité ved Army Medical University (AMUWEC20234543).
1. Forberedelse af gnaverkropsfikseringsanordning
- Design en holder til små dyr baseret på det kinesiske brugsmodelpatent9.
- Fremstil enheden gennem 3D-printteknologi.
- Forbered et 2 m langt reb og del det i 6 reb. Træk disse 6 reb gennem hullerne i fiksatoren. Brug det fjederbelastede spænde til at fastgøre rebenderne, hvilket letter justering af løkkestørrelsen.
BEMÆRK: Fixatoren kan fremstilles af ethvert firma udstyret med 3D-printteknologi baseret på en designtegning. Enhedens designtegning er vist i figur 1. Fiksatoren, der blev brugt i denne undersøgelse, blev produceret af en 3D-printer ved en udskrivningsmetode kaldet smeltet aflejringsmodellering (FDM), også kendt som smeltet filamentfabrikation (FFF)10. Denne additive fremstillingsmetode udskriver delene af designet lag for lag ved selektivt at deponere materialet i smeltet form i en forudbestemt bane. Processen bruger termoplastiske polymerer, der kommer i filamenter for at skabe den endelige fysiske struktur. Immobiliseringsapparatet, der anvendes i denne undersøgelse, kan sikre tre dyr samtidigt, hvilket kræver seks reb, hvor hvert dyr kræver et par reb: et til halsen og et til stammen.
2. Forberedelse af gnavere
- Køb 3 Sprague-Dawley rotter (10-40 g, 7-45 dage gamle) og 3 C57 BL/C mus (5-40 g).
- Opdræt dyr i et rum med en 12 timers dag/nat-cyklus, en omgivelsestemperatur på 21-23 °C og en fugtighed på 45-60%. Desinficere og ventilere fodringsmiljøet regelmæssigt, og lad dyrene spise og drikke frit.
3. Fastgørelse af gnavere til fiksatoren (udsat position)
- Placer gnaverens hoved i det U-formede hul foran fiksatoren, med gnaveren i en udsat position. Før gnaverens krop gennem to rebsløjfer.
- Fastgør rebene rundt om gnaverens hals og mave, og sørg for, at den ikke kan undslippe, men ikke så tæt, at den forårsager åndedrætsbesvær og død.
- Det vigtigste trin er at fastgøre nakken på plads. Efterlad et mellemrum på 2-5 mm mellem gnaverens hals og rebet. Sørg for, at rebet ikke er for stramt til, at dyrene kan kvæle eller for løst til at undslippe.
- Fastgør de andre gnavere på samme måde i enheden.
- Ovenstående fikseringstrin (3.1-3.2) gentages i 3 dage for at minimere den potentielle stressrespons forårsaget af fikseringsproceduren. Gentag fikseringsproceduren i 3 på hinanden følgende dage, hvor hver session varer 5 minutter om dagen.
BEMÆRK: For at sikre, at gnavere ikke blev overbelastet under fikseringsproceduren, gentog vi proceduren i 3 på hinanden følgende dage. Hver session varede 5 minutter om dagen, hvilket gav rigelig tid for mus eller rotter til at akklimatisere sig til proceduren og minimere ethvert potentielt ubehag. - Strat EA fra dag 4.
- For at forhindre spredning af sygdom nedsænkes en steril vatpind eller kugle i 75% alkohol og tørres holderen grundigt af for at rengøre og desinficere den før og efter hver brug. Brug handsker og andet beskyttelsesudstyr for at undgå potentielle sundhedsrisici ved håndtering af gnavere.
4. Udførelse af EA i mus eller unge rotter (MS6)
- Vælg 0,25 mm x 13 mm sterile engangsakupunkturnåle.
- Find akupunkterne efter anatomisk placering, og bekræft indsættelsesdybden ved akupunktet.
BEMÆRK: MS6 er placeret på den laterale side af hovedet. Denne region i hovedet passerer gennem forbindelsen mellem Shencong (Ex-hn1) og Xuanli (GB6), også kendt som den forreste parietal (Du21). MS6 svarer til udtrykket af den præcentrale gyrus i hjernebarken i hovedbunden. Ex-hn1 er placeret 0,5 cm bag midtpunktet af hovedets forreste bageste midterlinje. GB6 er placeret i midtpunktet af forsiden af øret og øjets endevinkel. Den overlegne supratrochleære nerve, supraorbital nerve, occipital nerve og auriculotemporal nerve fordeles i den. MS6 bruges hovedsageligt til behandling af slagtilfælde og encefalopati, såsom motoriske lidelser. - Drej langsomt og indsæt sterile nåle bilateralt i MS6 i en dybde på 3/5 fra henholdsvis den forreste Shenchong (Exhn1) til Xuanli (GB6) langs den subkutane i 3 gnavere.
- Tilslut den ene side af tilslutningskablet til EA-instrumentet.
- Tilslut en anden side af tilslutningskablet, der indeholder de positive og negative EA-clips, til akupunkturnåleskaftene på venstre og højre MS6.
- Tænd EA-instrumentet.
- Drej knappen (Funktion / Vælg kontakt) for at indstille frekvens og funktionstilstand.
- Indstil frekvensen til 10 Hz, og vælg en kontinuerlig bølgetilstand .
- Drej den tilsvarende knap (Juster intensitet) for at indstille intensiteten. Hver justeringsintensitetsknap styrer strømstyrken af gnavere på ledningen, der er tilsluttet under den. Juster strømintensiteten til det acceptable interval af gnavere, normalt 1-2 mA, der varer 5 min.
BEMÆRK: Det er vigtigt at overvåge gnaverenes vejrtrækning og opførsel under proceduren for at sikre, at de ikke oplever nogen nød eller ubehag. Hvis rotten ser ud til at kæmpe eller have smerter, skal proceduren straks stoppes.
5. Fastgørelse af gnavere til fiksatoren (liggende stilling)
- Placer gnaverens hoveder i det U-formede hul foran fiksatoren, med gnaveren i en udsat position. Før gnaverens krop gennem to rebsløjfer.
- Fastgør rebet rundt om gnaverens hals og mave, og sørg for, at det ikke kan undslippe, men ikke så stramt, at det forårsager åndedrætsbesvær og død.
BEMÆRK: De punkter, der skal noteres under fiksering, er de samme som i trin 3.2. - Fastgør de andre gnavere på samme måde.
- Som i trin 3.4 gentages ovenstående fikseringstrin i 3 dage for at reducere gnaveres stressrespons.
- Strat EA fra dag 4.
BEMÆRK: Desinfektion udføres som nævnt i trin 3.6.
6. Udførelse af EA (ST25)
- Vælg 0,25 mm x 13 mm sterile engangsakupunkturnåle.
- Find akupunkterne efter anatomisk placering, og bekræft indsættelsesdybden ved akupunktet.
BEMÆRK: ST25 er placeret på niveauet af umbilicus. Placering af dette punkt i gnavere kræver først måling af længden af gnaverens pote. ST25 er placeret på 2/3 længden af poten ved siden af navlen. For eksempel, hvis gnaverens målte pote er 0,6 cm, er ST25 placeret 0,4 cm til højre og venstre for umbilicus. - Drej langsomt og træng sterile nåle ind i ST25 bilateral i en dybde på henholdsvis 4-8 mm på 3 gnavere.
- Tilslut den ene side af tilslutningskablet til EA-instrumentet.
- Tilslut den anden side af tilslutningskablet, der indeholder de positive og negative EA-clips, til akupunkturnåleskafterne på venstre og højre ST25.
- Tænd EA-instrumentet.
- Drej knappen (Funktion / Vælg kontakt) for at indstille frekvens og funktionstilstand.
- Indstil frekvensen til 10 Hz, og vælg Kontinuerlig bølgetilstand.
- Drej den tilsvarende knap (Juster intensitet) for at indstille intensiteten. Hver knap til justering af intensitet styrer strømstyrken af rotten på ledningen, der er tilsluttet under den. Juster strømintensiteten til det acceptable interval af gnavere, normalt 1-2 mA, der varer 5 min.
BEMÆRK: Observationerne var de samme som i trin 4.6.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Grundplanen for den dyrekropsfiksator, vi designede, er vist i figur 1. Derudover blev en 3D-grafisk model af denne fixator indsendt for at give et omfattende overblik over designet (supplerende fil 1). Dette er en enhed, der gør det muligt at immobilisere 3 gnavere og udføre EA samtidigt. Rotter og mus var begrænset til fiksatoren i vågen tilstand, og både udsatte og liggende stillinger kunne fastgøres fast uden at forårsage skade på gnavere (figur 2 og figur 3). Ved hjælp af fiksatoren blev MS6 og ST25 akupunkterne med succes placeret og nålet i gnavere (figur 4 og figur 5).
For at kontrollere variabler og validere effektiviteten af denne fikseringsmetode immobiliserede en eksperiment 3 rotter (Video 1) eller 3 mus i tre på hinanden følgende forsøg i en sammenlignende undersøgelse (tabel 1). Resultatet viste, at den gennemsnitlige tid til immobilisering af 3 rotter i udsatte og liggende stillinger ved hjælp af dette værktøj var henholdsvis 77,1 s ± 7,8 s og 74,9 s ± 8,6 s (gennemsnit ± SD). Hvad angår 3 mus, var den gennemsnitlige immobiliseringstid i udsatte og liggende positioner ved hjælp af denne fiksator henholdsvis 72,0 s ± 10,5 s og 62,3 ± 4,2 s (gennemsnitlig ± SD). Begge grupper af rotter og mus blev med succes immobiliseret på enheden og undslap ikke under 5-minutters EA-behandling (figur 2 og figur 3). Ved 1-2 mA EA-intensitet følte mus og rotter sig godt tilpas og kæmpede ikke voldsomt. Respirationen hos mus og rotter var stabil, og der forekom ingen pludselige dødsfald hos dyr. Efter behandlingen forblev musene og rotterne sunde og overlevede.
Figur 1. Batch gnaverfiksator grundplan. (1) Gnaverholderanordning, opdelt i tre dele. (2,3) Søjler: bruges til at fiksere lemmerne på mus eller unge rotter. (4) Cave: bruges til at fastgøre hovedet. (5) Hul: bruges til at fastgøre halsen på de unge rotter. (6) Hul: bruges til at fastgøre kroppen. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: Faste unge rotter i udsatte og liggende stillinger. (A-C) EA-behandling på MS6 akupunkt. (D-F) EA-behandling på ST25 akupunkt. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 3: Faste mus i udsatte og liggende stillinger. (A-C) EA-behandling på MS6 akupunkt. (D-F) EA-behandling på ST25 akupunkt. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 4: MS6 i cerebral regionen. MS6 er placeret på den laterale side af hovedet og er placeret ved forbindelsespunktet mellem Shencong (Ex-hn1) og Xuanli (GB6), som også er kendt som den forreste parietale (Du21) region. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 5: ST25 bilateralt punkt i rødt. ST25 er placeret på niveauet af umbilicus. Placering af dette punkt i gnaver kræver først måling af længden af gnaverens pote. ST25 er placeret på 2/3 længden af poten ved siden af navlen. For eksempel, hvis gnaverens målepote er 0,6 cm, er ST25 0,4 til højre og venstre for umbilicus. Klik her for at se en større version af denne figur.
| Forsøg | Rotter | Mus | ||
| Udsat position | Liggende stilling | Udsat position | Liggende stilling | |
| (tid i sekunder) | (tid i sekunder) | (tid i sekunder) | (tid i sekunder) | |
| Forsøg 1 | 75.5 | 65.1 | 60.2 | 62.3 |
| Forsøg 2 | 70.2 | 80.3 | 80.1 | 70.6 |
| Forsøg 3 | 85.5 | 79.5 | 75.7 | 65.9 |
| Gennemsnitlig tid (gennemsnit ± SD) | 77,1 ± 7,8 | 74,9 ± 8,6 | 72,0 ± 10,5 | 62.3 ± 4.2 |
Tabel 1: Tid brugt på fiksering af rotter og mus med udsatte og liggende stillinger. Dataene (tid i sekunder) blev opnået af en eksperimentator, der immobiliserede henholdsvis 3 rotter og 3 mus i 3 på hinanden følgende forsøg. Den gennemsnitlige krævede tid blev bestemt ved at beregne gennemsnits- og standardafvigelsen for den tid, det tog for de 3 forsøg.
Supplerende fil 1: 3D-trykt bad gnaver fixator design fil. Denne 3D-model kan trækkes for at opnå en fuld 360° visning af designet. Klik her for at downloade denne fil.
Video 1: Film af tilbøjelig og liggende positionsfiksering af unge SD-rotter, som beskrevet detaljeret i figur 2-forklaringen . Denne video viser en eksperimentator, der fastholder 3 rotter i både liggende og udsatte positioner. Klik her for at downloade denne video.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Elektroakupunktur (EA) er en form for akupunktur, der involverer brug af elektrisk stimulering på akupunkturnåle11. Denne teknik indebærer anvendelse af mikropulsstrømme af specifik intensitet og frekvens for at stimulere akupunkturpunkter og opnå forbedrede terapeutiske virkninger3. EA's mekanisme til helbredelse er imidlertid begrænset og kræver omfattende grundforskning for at bevise 1,2,3. Gnavermodeller er almindeligt anvendt i grundlæggende EA-undersøgelser 8,12,13, og vi sigter mod at give en hurtig og effektiv metode til at udføre disse forsøg på rotter og mus.
I øjeblikket står EA-eksperimentet over for mange udfordringer. Den primære udfordring er effektivt at immobilisere gnavere uden bedøvelse. Stabil immobilisering af dyr er afgørende og har en betydelig indvirkning på resultatet af dyreforsøget. Ellers er de bedøvede dyrs fysiologiske funktioner forskellige fra vågne dyrs, og klinisk akupunkturbehandling udføres altid på vågne patienter. Derfor er eksperimentelle undersøgelser med vågne dyr mere praktiske til kliniske formål. Tidligere var immobilisering med en fikseringsplade den foretrukne metode, men det var tidskrævende og tillod kun drift af en enkelt gnaver14. Traditionelle startspærre krævede også at binde gnaverens lemmer, hvilket var en tidskrævende proces og ofte resulterede i smerter på grund af den stramme fastgørelse. Flere undersøgelser har implementeret tape til mus, men deres evne til let at undslippe udgør betydelige udfordringer, især under akupunkturprocedurer8. Når der er flere eksperimentelle emner, kræves batchoperation ofte for at spare tid og kræfter2. Derfor har vi udviklet en 3D-printet batchfiksator til små dyr, der giver flere fordele i forhold til traditionelle fikseringsmetoder15: 1) det forkorter fikseringstiden, hvilket i høj grad forbedrer den eksperimentelle effektivitet16; 2) det er enkelt og let at bruge og påvirkes ikke af subjektive faktorer15,16; 3) Det førte mindre skadeligt for gnavere; 4) Når EA-operationen er fast, kan den udføres på flere unge rotter på samme tid, hvilket sparer tid og muliggør samtidig observation af behandlingsresultater.
Brugen af 3D-printteknologi til eksperimentelle undersøgelser af EA er en værdifuld udvidelse inden for akupunkturforskning. Enheden kan justeres til enhver størrelse, når den 3D-printes, hvilket hjælper eksperimentel akupunktur med at blive udført mere effektivt. Fused deposition modeling (FDM), også kendt som smeltet filamentfabrikation (FFF), en additiv fremstillingsmetode10, bruges til 3D-udskrivning af fiksatoren. Denne enhed er ikke kun egnet til dette eksperiment, men også til udførelse af eksperimenter som CT eller MR på gnavere17,18. Derudover kan den også anvendes i enhver situation, hvor bulkfiksering er nødvendig, undtagen EA-undersøgelser. På grund af udbredelsen af 3D-printteknologi er denne enhed let tilgængelig. Det kan laves gennem en lokal 3D-printproducent. Desuden kan denne fastgørelsesenhed ændres og tilpasses baseret på designtegningen. I denne undersøgelse består fastgørelsesanordningen af tre sektioner, der hver er i stand til at fastgøre en enkelt gnaver. Hvis yderligere gnavere eller andre dyr skal medtages, kan enheden skaleres proportionalt for at imødekomme det større antal. For eksempel kan den designes som en enhed, der kan fikse 5 mus eller endda som en fastgørelsesanordning til andre dyr som kaniner.
En anden udfordring er at finde akupunkter hos gnavere, der svarer til mennesker. MS6 og ST25 akupunkter blev valgt til at undersøge virkningerne af tilbøjelig og liggende fiksering. Desuden er disse to akupunkter blevet undersøgt af mange forskere 6,7,19. MS6 bruges oftest i hjernesygdomsforskning, såsom Parkinsons sygdom, dysfunktion efter cerebral slagtilfælde osv. 6,13,19. MS6 kunne forbedre den neurologiske funktion hos rotter, der lider af iskæmisk slagtilfælde via modulering af JAK / STAT-signalvejen, der medieres af IL-12 i en tidligere undersøgelse13. ST25 bruges normalt til behandling af mave-tarmkanalen, såsom diarré og irritabel tarmsyndrom (IBS)7,12. En tidligere undersøgelse har rapporteret, at EA udelukkende anvendt på ST25-punktet viste potentialet til at lindre visceral overfølsomhed og samtidig genoprette normal langsom bølgefrekvens og tyktarmsrytme hos IBS-rotter12. Disse to akupunkter er også i stand til passende at demonstrere virkningerne af liggende og tilbøjelige positionering hos gnavere. Disse to akupunkter har også betydningen af display 6,7,19. Da disse to akupunkter er blevet undersøgt af mange forskere, giver vi en protokol om, hvordan man lokaliserer disse to akupunkter hos gnavere. Det er nyttigt til dyreforsøg, hvor MS6- og ST25-undersøgelser udføres. Den nuværende undersøgelse har dog nogle begrænsninger. For eksempel kan nålens position og skærdybde ikke måles objektivt og kan variere afhængigt af operatørens erfaringsniveau.
Vores eksperimenter overholder "3R" princippet om dyreetik og er godkendt af laboratoriet Animal Welfare and Ethnic Committee of the Army Medical University. Det mest udfordrende og afgørende trin i dette eksperiment er at finde en pålidelig og effektiv metode til sikkert at immobilisere gnavere. Dette skyldes, at ethvert forsøg på at flygte eller dø af gnavere under 5-minutters EA-stimulering vil resultere i, at eksperimentet mislykkes. Designet af den forreste hule udnytter gnavernes præference for at grave huller. Placering af gnaverens hoved inde i hulen er beregnet til at give psykologisk komfort. Desuden skal rebene, der bruges til at fastgøre gnaverens hoved og krop, være moderat sikre og hverken forblive for slappe eller overstramme for at undgå, at gnaveren undslipper, og forhindre åndedrætsbesvær. Efter elektrisk stimulering blev gnavernes adfærd og reaktioner nøje overvåget. Ideelt set, når der anvendes en strøm på 1-2 mA, ville gnavere ikke udvise aggressiv kamp eller vokaliseringer som reaktion på elektrisk stød20. Fixatoren kan også bruges til at fastgøre gnavere i liggende, udsatte positioner og andre typer fikseringer efter behov. Det er velegnet til en række eksperimentelle behov, og fikseringsoperationen er let at udføre21. Dette har dog medført en begrænsning af, at dyr af forskellig størrelse kræver skræddersyet immobiliseringsudstyr af forskellig størrelse. Kun dyr med små størrelsesforskelle kan fastholdes ved hjælp af den samme enhed. Den batchimmobiliseringsfiksator, der anvendes i denne protokol, immobiliserer effektivt og pålideligt gnavere inden for vægtområdet 10-40 g. For dyr uden for dette vægtområde er der behov for tilpassede batchimmobiliseringsfiksatorer, der passer til deres specifikke krav.
Derudover giver den 3D-printede batchfiksering af gnavere, der bruges til bulk EA-operationer på gnavere, forbedret sikkerhed, da den er modstandsdygtig over for gnaverridser og bid. Undersøgelser af EA på gnavere har givet værdifuld indsigt i de potentielle fordele ved denne terapeutiske modalitet hos mennesker 1,2,3,6,7,11,14. Enheden er gavnlig for fremme af eksperimentel videnskabelig forskning i EA. Denne teknik gør det muligt for forskere at udføre dyreforsøg, der kræver immobilisering af dyr. Desuden præsenterer den den nøjagtige placering af ST25 og MS6, som kan tjene som reference for dem, der studerer disse to akupunkter i fremtiden. I sidste ende forventes denne metode at føre til værdifulde dyremodeller til EA-forskning.
Den 3D-printede batchmusefiksator, der er beskrevet i dette papir, tilbyder en enkel og effektiv metode til at udføre EA-eksperimenter med rotter eller mus. Dens design tager hensyn til dyrenes komfort og sikkerhed samt behovet for hurtig og effektiv fiksering. Denne enhed har potentialet til at spare tid og kræfter i at udføre dyreforsøg, fremme fremskridt inden for elektroakupunkturforskning og i sidste ende føre til bedre behandlinger for forskellige sygdomme.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne erklærede, at der ikke findes konkurrerende interessekonflikter.
Acknowledgments
Tak til Institut for Neurokirurgi på det andet tilknyttede hospital på Army Medical University for støtte på stedet. Finansiering: Dette arbejde blev støttet af Natural Science Foundation of China (82104696).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 3D printing batch mice fixator | MESH INVENT | Custom made | The fixator produced by 3D printer. The printing method is called fused deposition modeling (FDM), also known as fused filament fabrication (FFF). |
| Electroacupuncture instrument | Hwato, Suzhou Medical Appliance Factory | SDZ-III | www.Hwato-med.com |
| Disposable sterile acupuncture needle | Suzhou Medical Appliance Factory | N/A | 0.25 mm x 13 mm |
References
- Lee, S., Kim, S. N. The effect of acupuncture on modulating inflammatory cytokines in rodent animal models of respiratory disease: A systematic review and meta-analysis. Frontiers in Immunology. 13, 878463 (2022).
- Xin, Y. Y., Wang, J. X., Xu, A. J. Electroacupuncture ameliorates neuroinflammation in animal models. Acupuncture in Medicine: Journal of the British Medical Acupuncture Society. 40 (5), 474-483 (2022).
- Mengzhu, S., et al. Electroacupuncture at Tianshu (ST25) and Zusanli (ST36) alleviates stress-induced irritable bowel syndrome in mice by modulating gut microbiota and corticotropin-releasing factor. Journal of traditional Chinese medicine. 42 (5), 732-740 (2022).
- Xu, D. S., et al. A new attempt of re-mapping acupoint atlas in the rat. Acupuncture Research. 44 (1), 62-65 (2019).
- Yin, C. S., et al. A proposed transpositional acupoint system in a mouse and rat model. Research in Veterinary Science. 84 (2), 159-165 (2008).
- Cao, L., et al. The effectiveness of acupuncture for Parkinson's disease: An overview of systematic reviews. Complementary Therapies in Medicine. 50, 102383 (2020).
- Yang, L., et al. Effect of warming moxibustion Tianshu (ST 25, bilateral) and Qihai (CV 6) for the treatment of diarrhea-dominant irritable bowel syndrome: a patient-blinded pilot trial with orthogonal design. Journal of Traditional Chinese Medicine. 37 (4), 538-545 (2017).
- Delcour, M., et al. Early movement restriction leads to maladaptive plasticity in the sensorimotor cortex and to movement disorders. Scientific Reports. 8 (1), 16328 (2018).
- A fixing device for mice body. China Patent. Zhifeng, W. , 202220586749 (2023).
- Ismail, K. I., Yap, T. C., Ahmed, R. 3D-printed fiber-reinforced polymer composites by fused deposition modelling (FDM): Fiber length and fiber implementation techniques. Polymers. 14 (21), 4659 (2022).
- Lu, C., et al. Efficacy of electroacupuncture with different frequencies in the treatment of chemotherapy-induced peripheral neuropathy: A study protocol for a randomized controlled trial. Frontiers in Neurology. 13, 843886 (2022).
- Zhang, L., et al. Modulation of colonic function in irritable bowel syndrome rats by electroacupuncture at ST25 and the neurobiological links between ST25 and the colon. Frontiers in Neuroscience. 16, 930489 (2022).
- Wang, J. H., et al. Anti-inflammation mechanism of electro-scalp acupuncture in treatment of ischemic stroke based on IL-12 mediated JAK/STAT signaling pathway. Chinese Acupuncture & Moxibustion. 42 (10), 1137-1144 (2022).
- Ren, D., et al. A novel design of a plate for posterolateral tibial plateau fractures through traditional anterolateral approach. Scientific Reports. 8 (1), 16418 (2018).
- Wu, L., Dong, Y., Zhu, C., Chen, Y. Effect and mechanism of acupuncture on Alzheimer's disease: A review. Frontiers in Aging Neuroscience. 15, 1035376 (2023).
- Wu, L. Electroacupuncture for spinal cord injury: A scientific study of traditional medicine. Neurospine. 19 (3), 770-772 (2022).
- Gozzi, A., Zerbi, V.
- Denic, A., Macura, S. I., Mishra, P., Gamez, J. D., Rodriguez, M., Pirko, I.
- Cong-hui, Q., et al. Efficacy observation of long-retaining scalp acupuncture plus interactive training for upper-extremity dysfunction after cerebral stroke. Journal of Acupuncture and Tuina Science. 19, 43-48 (2021).
- Kvist, L. J., Hall-Lord, M. L., Rydhstroem, H., Larsson, B. W. A randomised-controlled trial in Sweden of acupuncture and care interventions for the relief of inflammatory symptoms of the breast during lactation. Midwifery. 23 (2), 184-195 (2007).
- Boram, L., Chan-Young, K., Sun Haeng, L. Effectiveness and safety of auriculotherapy for breastfeeding: a systematic review. Journal of Traditional Chinese Medicine. 40 (5), 721-737 (2020).
