Summary

Onderzoek naar keuzes in de levensgeschiedenis: temperatuur en substraattype gebruiken als op elkaar inwerkende factoren voor voorkeuren van bromvlieglarven en vrouwtjes

Published: November 17, 2023
doi:

Summary

Hierin worden twee protocollen beschreven voor het beoordelen van voedselbron- en ovipositievoorkeuren bij larven en vrouwtjes van bromvliegen. Deze bestaan uit vier keuzes met twee factoren die op elkaar inwerken: het type substraat en de temperatuur. De testen maken het mogelijk om de voedselbronvoorkeur van de larven en de voorkeur voor de ovipositieplaats van de vrouwtjes te bepalen.

Abstract

Bromvliegen (Diptera: Calliphoridae) vertonen een breed scala aan larvale levensstijlen, meestal geclassificeerd als obligaat parasitisme, facultatief parasitisme en volledige sapro-necrofagie. Verschillende parasitaire soorten, zowel obligate als facultatieve, worden beschouwd als van sanitair en economisch belang, omdat hun larven myiasis (madenbesmetting in levend weefsel) kunnen veroorzaken. Het is echter opmerkelijk dat het volwassen vrouwtje een beslissende rol speelt bij het kiezen van de ovipositieplaats en daarom grotendeels de voedingsgewoonte en ontwikkelingsomstandigheden van de larven bepaalt. In deze studie worden twee protocollen voorgesteld om de voedingsvoorkeur van larven en de voorkeur voor de vrouwelijke ovipositieplaats te testen, rekening houdend met twee op elkaar inwerkende factoren: het type vleessubstraat en de temperatuur. De hier gepresenteerde opstellingen maakten het mogelijk om Lucilia cuprina-larven en drachtige vrouwtjes te testen in een vierkeuzetest met twee temperaturen (33 ± 2 °C en 25 ± 2 °C) en twee soorten vleessubstraten (vers vlees aangevuld met bloed en 5 dagen oud bedorven vlees). Larven of drachtige vrouwtjes kunnen ervoor kiezen om respectievelijk hun eieren in te graven of te leggen in een van de volgende situaties: bedorven vlees bij 25 °C (simulatie van een acrofaag soort), vers vlees aangevuld met bloed bij 33 °C (simulatie van een parasitaire soortconditie) en twee controles, bedorven vlees bij 33 °C of vers vlees aangevuld met bloed bij 25 °C. De voorkeur wordt beoordeeld door het aantal larven of eieren te tellen dat in elke optie voor elke replica is gelegd. Door de waargenomen resultaten te vergelijken met een willekeurige verdeling, kon de statistische significantie van de voorkeur worden ingeschat. De resultaten gaven aan dat larven van L. cuprina een sterke voorkeur hebben voor het rotte substraat bij 25 °C. Omgekeerd was de voorkeur van vrouwtjes voor de ovipositieplaats meer gevarieerd voor het vleestype. Deze methodologie kan worden aangepast om de voorkeur van andere insectensoorten van vergelijkbare grootte te testen. Andere vragen kunnen ook worden onderzocht door gebruik te maken van alternatieve voorwaarden.

Introduction

Vliegen, met name kelkvormige muskoïden (waaronder bromvliegen, huisvliegen, botvliegen en vleesvliegen), vertonen een breed scala aan levensstijlen, waaronder parasitair en necro-saprofage gedrag. Parasitaire soorten veroorzaken meestal myiasis, een aantasting van levende weefsels door maden (larven)2. In de familie Calliphoridae zijn zowel obligate als facultatieve parasitaire soorten belangrijke veeplagen die verantwoordelijk zijn voor economische verliezen en slecht dierenwelzijn als gevolg van madenplagen 2,3,4,5,6,7. Obligate parasieten, zoals de schroefwormen van de Nieuwe Wereld en de Oude Wereld (respectievelijk Cochliomyia hominivorax en Chrysomyia bezziana), zijn bijzonder problematisch 4,7,8,9,10 samen met facultatieve parasieten, zoals de schapenbromvliegen (Lucilia cuprina en Lucilia sericata)2,5,6, 7. okt. Niet-parasitaire soorten, waaronder sapro-necrofaag, ontwikkelen zich in rottend en necrotisch organisch materiaal en worden vaak aangetroffen in onhygiënische omgevingen. Hun strikt niet-parasitaire levensstijl kan met succes worden gebruikt voor madentherapie, waarbij vliegenlarven worden gebruikt om wonden van necrotische weefsels schoon te maken11,12,13. Bromvliegen worden ook gebruikt in de forensische wetenschap, omdat ze tot de eerste organismen behoren die recent overleden lichamen lokaliseren en koloniseren, waarbij de zich ontwikkelende larven dienen als een middel om het tijdstip van overlijden te schatten14.

De levensstijl van bromvliegen is het onderwerp geweest van verschillende onderzoeken (bijv. 15,16,17,18,19,20,21) vanwege hun betekenis in relatie tot menselijke belangen. Inzicht in de biologische mechanismen die de levensstijl van een soort bepalen, kan waardevolle inzichten opleveren in het verbeteren van methoden die gericht zijn op het bestrijden van plaagsoorten. Bovendien bieden de diversiteit en evolutie van de levensstijl van bromvliegen een ideale context om de oorsprong en mechanismen van complexe eigenschappen (bijv. parasitisme) te bestuderen. Parasitisme als gevolg van maden die zich voeden met levend weefsel is verschillende keren onafhankelijk geëvolueerd binnen de familie Calliphoridae22,23. De evolutionaire geschiedenis van de voedingsgewoonten van bromvliegen is echter nog grotendeels onbekend, met studies die beperkt zijn tot het in kaart brengen van de gewoonten langs fylogenieën (bijv. 16,19,22) zonder de hulp van functionele assays. Het is bijvoorbeeld onzeker of obligate parasieten zijn geëvolueerd uit generalisten (d.w.z. facultatieve parasieten) of rechtstreeks uit necrofaag soorten. De moleculaire, fysiologische en gedragsprocessen die gepaard gaan met de evolutionaire verschuivingen in levensstijl zijn ook grotendeels onbekend.

In deze context bieden facultatieve parasieten, zoals de schaapskogelvlieg Lucilia cuprina, die zich kunnen ontwikkelen als parasieten op een gastheer of als necrofagen op kadavers, de mogelijkheid om de factoren en mechanismen te onderzoeken die levensstijlkeuzes bepalen. Lucilia cuprina is een kosmopolitische soort die bekend staat om het veroorzaken van schapenvliegen, vooral in Australië, waar het als een plaag wordt beschouwd 3,16. Myiasis als gevolg van L. cuprina kan ook voorkomen bij andere veedieren, huisdieren en mensen 3,24,25,26,27,28,29,30. De larven kunnen zich echter ook ontwikkelen in necrotische weefsels en rottend materiaal en deze soort is met succes gebruikt in de forensische entomologie omdat het zeer snel is om lijken te lokaliseren en te koloniseren31,32,33,34. Hoewel de parasitaire versus niet-parasitaire levensstijl van bromvliegen wordt bepaald door het larvale stadium, is het het volwassen vrouwtje dat de ovipositieplaats selecteert. Bijgevolg heeft het volwassen vrouwtje een grote invloed op de levensstijl van de larven, omdat deze laatste een beperkte mobiliteit hebben. De keuze van het vrouwtje betekent echter niet noodzakelijkerwijs dat de larven de voorkeur geven aan hetzelfde substraat wanneer ze een keuze krijgen35. Een hypothese is dat gedragsveranderingen die ertoe leiden dat vrouwtjes hun eieren op levend weefsel leggen, deel kunnen hebben uitgemaakt van een vroege omschakeling naar een parasitaire levensstijl. Pre-adaptaties of fysiologische vermogens van de resulterende larven zouden essentieel zijn geweest voor hun succesvolle ontwikkeling op het levende weefsel, wat leidde tot het ontstaan van de parasitaire levensstijl. Als zodanig hoeven de beïnvloede en geselecteerde processen niet noodzakelijkerwijs op één lijn te liggen tussen beide levensfasen.

In deze context werden twee methoden ontwikkeld om gedragsvoorkeur bij bromvliegen te testen, in het bijzonder voor L. cuprina, met betrekking tot het voedingssubstraat van de larven (larvale voorkeurstest) en de ovipositieplaats (vrouwelijke voorkeurstest). Deze methoden houden rekening met twee op elkaar inwerkende factoren: temperatuur en versheid van het vlees. Temperatuur werd gekozen als een cruciale factor, aangezien de meeste gevallen van myiasis voorkomen bij homeotherme dieren2. Daarom werd een temperatuur van 33 °C gekozen als proxy voor de “parasitaire levensstijlfactor”, terwijl een temperatuur van 25 °C (kamertemperatuur) de “niet-parasitaire factor” vertegenwoordigt. Er is gekozen voor een temperatuur van 25 °C omdat deze representatief is voor de gemiddelde jaartemperatuur die in Brazilië is geregistreerd (Nationaal Instituut voor Meteorologie, INMET). Daarnaast werden twee soorten vleessubstraten overwogen, beide afkomstig van runderen: (i) vers vlees aangevuld met bloed, dat het substraat nabootst voor de parasitaire levensstijl, dat wordt gebruikt om de parasitaire bromvlieg Co. hominivorax in laboratoriumomstandigheden te kweken36, en (ii) 5 dagen oud rot vlees, dat het substraat nabootst voor de necrofaag levensstijl. Het rundersubstraat wordt vaak gebruikt om L. cuprina te kweken in laboratoriumomstandigheden 27,37,38,39 omdat het verschillende voordelen biedt op het gebied van beschikbaarheid, kosteneffectiviteit en bruikbaarheid, terwijl het een ecologisch verantwoord substraat is. Andere studies40,41 waarin het effect van rotte versus verse substraten bij bromvliegen werd vergeleken, hebben 7 dagen oud rot substraat gebruikt (in anaërobe omstandigheden) en toonden een nadelig effect van het rotte substraat op ontwikkelingssnelheden, overleving en groei. Omdat bekend is dat L. cuprina verse kadavers koloniseert die meestal aan lucht worden blootgesteld, hebben we besloten om 5 dagen oud rot vlees (rundergehakt) te gebruiken in niet-hermetische potten (aërobe en anaërobe afbraak) om een necrofaag substraat na te bootsen.

De hier gepresenteerde experimentele ontwerpen bieden het voordeel van het onderscheiden van voorkeuren voor individuele factoren en hun gecombineerde effecten. Bovendien zijn de gescoorde fenotypen, namelijk de keuze van het voedingssubstraat voor de larven en het aantal gelegde eieren, direct relevant voor de biologische en ecologische aspecten van bromvliegsoorten. De geschiktheid van deze protocollen wordt benadrukt door hun effectiviteit in L. cuprina aan te tonen. Daarnaast wordt een script voor statistische analyse verstrekt, dat kan worden gebruikt om de waargenomen resultaten verkregen in L. cuprina te vergelijken met gesimuleerde willekeurige gegevens, waardoor robuuste statistische analyse en interpretaties worden gegarandeerd.

Protocol

Vliegenmonsters werden verkregen met behulp van vallen en niet op besmette dieren. Er werd een SISBIO-vergunning (67867-1) afgegeven om vliegen van de familie Calliphoridae in gevangenschap te verzamelen en te houden in laboratoriumomstandigheden. Insectenmonsters zijn vrijgesteld van ethische evaluatie in onderzoek in Brazilië. Rundvlees en -bloed werden commercieel verkregen en er was geen ethische goedkeuring vereist. 1. Voedingsvoorkeur voor larven Bereiding van…

Representative Results

Om de effectiviteit van de gepresenteerde methoden aan te tonen, werden de experimenten uitgevoerd met behulp van een laboratoriumpopulatie van Lucilia cuprina (familie: Calliphoridae), een facultatieve parasitaire bromvlieg2. De volledige ruwe dataset die voor deze soort is verkregen, is te vinden in aanvullend bestand S3 met de resultaten voor de larvale en vrouwelijke substraatvoorkeurstests. Om te beoordelen of de larven en vrouwtjes een voorkeur hebben voor een subst…

Discussion

Om de evolutie van voedingsgewoonten te begrijpen, met name in de context van parasitisme bij bromvliegen, is het nodig om de voorkeuren van het substraat te onderzoeken in de verschillende levensfasen voor voeding of ovipositie. Daarom werden in deze studie robuuste en eenvoudige methoden voorgesteld voor het onderzoeken van substraatvoorkeuren bij larven en vrouwtjes van bromvliegen. Deze methoden werden getest in Lucilia cuprina, een facultatieve parasitaire bromvlieg2. Interessant is …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

We danken Patrícia J. Thyssen, Gabriela S. Zampim en Lucas de Almeida Carvalho voor het leveren van de L. cuprina-kolonie en voor hun hulp bij het opzetten van het experiment. We willen ook Rafael Barros de Oliveira bedanken voor het filmen en monteren van de video. Dit onderzoek werd ondersteund door de Developing Nation Research Grant van Animal Behavior Society aan V.A.S.C. en door een FAPESP Dimensions US-Biota-São Paulo grant aan T.T.T. (20/05636-4). S.T. en D.L.F. werden ondersteund door een FAPESP (respectievelijk 19/07285-7 postdoctorale beurs en 21/10022-8 PhD-beurs). V.A.S.C. en A.V.R. werden ondersteund door CNPq PhD-beurzen (respectievelijk 141391/2019-7, 140056/2019-0). T.T.T. werd ondersteund door CNPq (310906/2022-9).

Materials

Agar Sigma-Aldrich 05038-500G For microbiology
Black cardboards 70×50 cm
Bovine blood with anticoagulat  50% pure bovine blood with anticoagulant (3.8% sodium citrate) + 50% of filtered water
Bovine ground Meat Around 7-8% of fat
Brush Made with plastic
Conical tube Falcon or Generic 50 mL
Cross-shaped glass containers Handmade NA 48×48 cm, 8 cm of height and 8 cm of width
Erlenmeyer Vidrolabor NA 500 mL
70% Ethanol Synth A1084.01.BL 70% ethyl ethanol absolute + 30% filtered water
Graduated cylinder Nalgon or Generic 500 mL and 50 mL
Heating pad Thermolux 30×40 cm dimensions, 40 W, 127 V
Infrared thermometer HeTaiDa HTD8808 Non-contact body thermometer (Sample Rate: 0.5 S,
Accuracy: ±0.2 °C,
Measuring: 5-15 cm)
Petri dish (Glass) Precision NA 150×20 mm dimensions
             (Note: the petri dishes can be plastic if used only once)
Petri dish PS Cralplast 18130 60×15 mm dimensions
Plastic Pasteur pipette 3 mL (total volume)
Sodium citrate Synth C11033.01.AG 3.8% Sodium citrate (38 g diluted in 1L of filtered water)
Spoons More than one spoon is necessary. Use one for each type of meat substrate. Preferably stainless steel.
Stainless steel spatula Generic Flat end and spoon end
Stereomicroscope Bioptika WF10X/22 lenses
Tweezer Metal made and fine point
White led light strips NA NA 4.8 W, 2×0.05 mm², 320 lumens, Color temperature:6500 K (white)

References

  1. Kutty, S. N., et al. Phylogenomic analysis of Calyptratae: Resolving the phylogenetic relationships within a major radiation of Diptera. Cladistics. 35 (6), 605-622 (2019).
  2. Zumpt, F. . Myiasis in Man and Animals in the Old World. A textbook for physicians, veterinarians and zoologists. , (1965).
  3. Hall, M., Wall, R. Myiasis of humans and domestic animals. Advances in Parasitology. 35, 257-334 (1995).
  4. Grisi, L., et al. Reassessment of the potential economic impact of cattle parasites in Brazil. Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária. 23 (2), 150-156 (2014).
  5. Sackett, D., Holmes, P., Abbot, K., Jephcott, S., Barber, M. Assessing the economic cost of endemic disease on the profitability of Australian beef cattle and sheep producers. Meat & Livestock Australian Report. AHW.087. Meat & Livestock Australian Report. , (2006).
  6. Heath, A. C. G., Bishop, D. M. Flystrike in New Zealand: An overview based on a 16-year study, following the introduction and dispersal of the Australian sheep blowfly, Lucilia cuprina Wiedemann (Diptera: Calliphoridae). Veterinary Parasitology. 137 (3-4), 333-344 (2006).
  7. Mullen, G. R., Durden, L. A. . Medical and veterinary entomology. , (2009).
  8. Spradbery, J. P. Screw-worm fly: A tale of two species. Agricultural Zoology Reviews. 6 (1), (1994).
  9. World Organization for Animal Health (OIE). New World screwworm (Cochliomyia hominivorax) and Old World screwworm (Chrysomya bezziana), Manual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals. World Organization for Animal Health (OIE). , (2013).
  10. Wardhana, A. H., Abadi, I., Cameron, M. M., Ready, P. D., Hall, M. J. R. Epidemiology of traumatic myiasis due to Chrysomya bezziana in Indonesia. Jurnal Ilmu Ternak dan Veteriner. 23 (1), 45 (2018).
  11. Linger, R. J., et al. Towards next generation maggot debridement therapy: Transgenic Lucilia sericata larvae that produce and secrete a human growth factor. BMC Biotechnology. 16 (1), 30 (2016).
  12. Fonseca-Muñoz, A., Sarmiento-Jiménez, H. E., Pérez-Pacheco, R., Thyssen, P. J., Sherman, R. A. Clinical study of Maggot therapy for Fournier’s gangrene. International Wound Journal. 17 (6), 1551 (2020).
  13. Franciéle, S. M., Demetrius, S. M., Patricia, J. T. Larval Therapy and the application of larvae for healing: review and state of the art in Brazil and worldwide. Revista Thema. 12 (01), 4-14 (2015).
  14. Greenberg, B. Flies as forensic indicators. Journal of Medical Entomology. 28 (5), 565-577 (1991).
  15. Stevens, J. R., Wallman, J. F., Otranto, D., Wall, R., Pape, T. The evolution of myiasis in humans and other animals in the Old and New Worlds (Part II): Biological and life-history studies. Trends in Parasitology. 22 (4), 181-188 (2006).
  16. Stevens, J. R. The evolution of myiasis in blowflies (Calliphoridae). International Journal for Parasitology. 33 (10), 1105-1113 (2003).
  17. McDonagh, L. M., Stevens, J. R. The molecular systematics of blowflies and screwworm flies (Diptera: Calliphoridae) using 28S rRNA, COX1 and EF-1α Insights into the evolution of dipteran parasitism. Parasitology. 138 (13), 1760-1777 (2011).
  18. Wallman, J. F., Leys, R., Hogendoorn, K. Molecular systematics of Australian carrion-breeding blowflies (Diptera:Calliphoridae) based on mitochondrial DNA. Invertebrate Systematics. 19 (1), (2005).
  19. Yan, L., et al. Monophyletic blowflies revealed by phylogenomics. BMC Biology. 19 (1), 230 (2021).
  20. Cardoso, G. A., Deszo, M. S., Torres, T. T. Evolution of coding sequence and gene expression of blowflies and botflies with contrasting feeding habits. Genomics. 113 (1), 699-706 (2021).
  21. Cardoso, G. A., Marinho, M. A. T., Monfardini, R. D., Espin, A. M. L. D. A., Torres, T. T. Evolution of genes involved in feeding preference and metabolic processes in Calliphoridae (Diptera: Calyptratae). PeerJ. 4, 2598 (2016).
  22. Stevens, J. R., Wallman, J. F. The evolution of myiasis in humans and other animals in the Old and New Worlds (part I): Phylogenetic analyses. Trends in Parasitology. 22 (3), 129-136 (2006).
  23. Wiegmann, B. M., et al. Episodic radiations in the fly tree of life. Proceedings of the National Academy of Sciences. 108 (14), 5690-5695 (2011).
  24. Azevedo, W. T. D. A., et al. Record of the first cases of human myiasis by Lucilia cuprina (Diptera: Calliphoridae), Rio de Janeiro, Brazil. Journal of Medical Entomology. 52 (6), 1368-1373 (2015).
  25. Bishop, D., Patel, D., Heath, A. A New Zealand case of nasal myiasis involving Lucilia cuprina (Diptera: Calliphoridae). The New Zealand Medical Journal (Online). 131 (1484), 68-70 (2018).
  26. Lukin, L. G. Human cutaneous myiasis in Brisbane: a prospective study. Medical Journal of Australia. 150 (5), 237-240 (1989).
  27. Paulo, D. F., et al. Specific gene disruption in the major livestock pests Cochliomyia hominivorax and Lucilia cuprina Using CRISPR/Cas9. G3 Genes|Genomes|Genetics. 9 (9), 3045-3055 (2019).
  28. Puttalakshmamma, G. C., Dhanalakshmi, H., D’souza, P. E., Ananda, K. J. Incidence of myiasis in domestic animals in Bangalore. Intas Polivet. 6 (2), 353-356 (2005).
  29. Rao, M. A. N., Pillay, M. R. Some notes on cutaneous myiasis in animals in the Madras presidency. Indian Journal of Veterinary Science. 6 (3), (1936).
  30. Soundararajan, C. Traumatic myiasis in an Indian peafowl (Pavo cristatus) due to Lucilia cuprina first report. Journal of Veterinary Parasitology. 34 (1), 49-51 (2020).
  31. Smith, K. G. V. . A manual of forensic entomology. , (1986).
  32. Goff, M. L. . A Fly for the Prosecution. , (2001).
  33. CRC Press. . Forensic entomology: the utility of arthropods in legal investigations. , (2001).
  34. Greenberg, B., Kunich, J. C. . Entomology and the law: flies as forensic indicators. , (2002).
  35. Ellis, A. M. Incorporating density dependence into the oviposition preference-offspring performance hypothesis. Journal of Animal Ecology. 77 (2), 247-256 (2008).
  36. Vargas, M. E. I., Azeredo-Espin, A. M. L. Genetic variability in mitochondrial DNA of the screwworm, Cochliomyia hominivorax (Diptera: Calliphoridae), from Brazil. Biochem Genet. 33, 237-256 (1995).
  37. Bambaradeniya, Y. T. B., Karunaratne, W. I. P., Tomberlin, J. K., Goonerathne, I., Kotakadeniya, R. B. Temperature and tissue type impact development of Lucilia cuprina (Diptera: Calliphoridae) in Sri Lanka. Journal of Medical Entomology. 55 (2), 285-291 (2018).
  38. Chaaban, A., et al. Insecticide activity of Curcuma longa (leaves) essential oil and its major compound α-phellandrene against Lucilia cuprina larvae (Diptera: Calliphoridae): Histological and ultrastructural biomarkers assessment. Pesticide Biochemistry and Physiology. 153, 17-27 (2019).
  39. Selem, G., Geden, C. J., Khater, H., Khater, K. S. Effects of larval diets on some biological parameters and morphometric and biochemical analysis of ovaries of Lucilia cuprina (Wiedemann) (Diptera: Calliphoridae). Journal of Vector Ecology. 48 (2), (2023).
  40. Fouche, Q., Hedouin, V., Charabidze, D. Effect of density and species preferences on collective choices: an experimental study on maggot aggregation behaviours. Journal of Experimental Biology. 224 (6), 233791 (2021).
  41. Richards, C. S., Rowlinson, C. C., Cuttiford, L., Grimsley, R., Hall, M. J. R. Decomposed liver has a significantly adverse affect on the development rate of the blowfly Calliphora vicina. International Journal of Legal Medicine. 127, (2013).
  42. Boulay, J., Deneubourg, J. -. L., Hédouin, V., Charabidzé, D. Interspecific shared collective decision-making in two forensically important species. Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences. 283 (1824), 20152676 (2016).
  43. Joseph, R. M., Devineni, A. V., King, I. F. G., Heberlein, U. Oviposition preference for and positional avoidance of acetic acid provide a model for competing behavioral drives in Drosophila. Proceedings of the National Academy of Sciences. 106 (27), 11352-11357 (2009).
  44. Mierzejewski, M. K., Horn, C. J., Luong, L. T. Ecology of fear: Environment-dependent parasite avoidance among ovipositing Drosophila. Parasitology. 146 (12), 1564-1570 (2019).
  45. Stensmyr, M. C., et al. A conserved dedicated olfactory circuit for detecting harmful microbes in drosophila. Cell. 151 (6), 1345-1357 (2012).
  46. Yang, S. -. T., Shiao, S. -. F. Oviposition preferences of two forensically important blow fly species, chrysomya megacephala and C. rufifacies (Diptera: Calliphoridae), and implications for postmortem interval estimation. Journal of Medical Entomology. 49 (2), 424-435 (2012).
  47. Brodie, B. S., Wong, W. H. L., VanLaerhoven, S., Gries, G. Is aggregated oviposition by the blow flies Lucilia sericata and Phormia regina (Diptera: Calliphoridae) really pheromone-mediated?: Pheromone-mediated Lucilia sericata and Phormia regina flies. Insect Science. 22 (5), 651-660 (2015).
  48. Horn, C. J., Liang, C., Luong, L. T. Parasite preferences for large host body size can drive overdispersion in a fly-mite association. International Journal for Parasitology. , (2023).
  49. Liu, W., et al. Enterococci mediate the oviposition preference of Drosophila melanogaster through sucrose catabolism. Scientific Reports. 7 (1), 13420 (2017).
  50. Parodi, A., et al. Black soldier fly larvae show a stronger preference for manure than for a mass-rearing diet. Journal of Applied Entomology. 144 (7), 560-565 (2020).

Play Video

Cite This Article
Cunha, V. A. S., Tandonnet, S., Ferreira, D. L., Rodrigues, A. V., Torres, T. T. Exploring Life History Choices: Using Temperature and Substrate Type as Interacting Factors for Blowfly Larval and Female Preferences. J. Vis. Exp. (201), e65835, doi:10.3791/65835 (2023).

View Video