Summary
المن ومرسلات فعالة للفيروسات النباتية. microinjection أولا بأول من الفيروس ، وهذا الإجراء سوف نظهر لكم اليوم ، هي تقنية تسمح للباحثين حقن الفيروس مباشرة في hemocoel من المن ، تجاوز الأمعاء ، واحدة من العقبات الرئيسية ل2 انتقال الفيروس بطريقة circulative. كما يستخدم نفس الأسلوب لحقن الرنا المزدوج الجديلة عن رني.
Abstract
البطاطا loafroll فيروس (PLRV) ، من عائلة Luteoviridae يصيب النباتات باذنجاني. تبث عليها المن ، في المقام الأول ، وأولا بأول ، الخوخ الأخضر. عندما يتغذى على حشرة مصابة بالعدوى أنها محطة عقود الفيروس عن طريق اللحاء النبات. بلعها مرة واحدة ، يجب أن الفيروس ينتقل من أمعاء الحشرة لالدملمف (دم الحشرات) ثم يجب ان تمر عبر الغدة اللعابية ، من أجل أن ينتقل مرة أخرى إلى محطة جديدة. وأولا بأول ، قد يستغرق فيروسات مختلفة عند المضغ على النبات ، ولكن فقط سوف جزء صغير يمر عبر الأمعاء والغدة اللعابية ، والحواجز الرئيسيان لإحالته إلى إصابة أكثر النباتات. في المختبر ، ونحن نستخدم لدراسة النباتات فوقعة PLRV الإرسال. في هذا المضيف ، وتتميز الأعراض داء الاخضرار التقزم وinterveinal (اصفرار الأوراق بين العروق مع عروق الخضراء المتبقية). شريط فيديو يوضح أن نقدم طريقة لأداء microinjection أولا بأول على الحشرات التي لا فيروسات PLVR ناقلات والاختبارات ما إذا كانت القناة الهضمية والوقاية من انتقال الفيروس. شريط فيديو يوضح أن نقدم طريقة لأداء microinjection الأفد على الحشرات التي لا فيروسات PLVR ناقلات والاختبارات ما إذا كانت الأمعاء أو الغدد اللعابية هو منع انتقال الفيروس.
Protocol
- لاختبار ما إذا كان قادرا على المن ناقلات الفيروس ، نطعم المن على الأنسجة المصابة لمدة 2 ايام.
- ثم ، ونحن نسمح لتغذية صحية في مصنع لمدة 5 أيام. ثم يتم تبخير المصنع وبعد 3 أسابيع نبدأ بالبحث عن الأعراض.
- عندما نجد أولا بأول ، التي لا يمكن ناقلات الفيروس ، يمكننا تقييم أي من الحواجز 2 هو وقف الفيروس باستخدام إجراء microinjection.
- يتم حقن الفيروس مباشرة في hemocoel ، متجاوزة بذلك الحاجز انتقال القناة الهضمية.
يرجى زيارة المراجعات السنوية للبيولوجيا النبات للحصول على مزيد من المعلومات حول هذه الحصانة ومصنع لبروتوكول الحشرات بالأعشاب.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
