एक Immunoperoxidase परख का उपयोग मानव Coronaviruses के अनुमापन

Summary

इस वीडियो में, हम और एक enzymatic प्रतिजन पहचान एक immunoperoxidase परख के रूप में जाना तकनीक का उपयोग वायरस का पता लगाने titering के लिए एक वैकल्पिक तरीका प्रदर्शित करता है. यहाँ, हम तुम्हें दिखाने के लिए, कैसे अपने वायरल नमूने एकत्र करने के लिए परीक्षण के लिए तैयार कोशिकाओं, और अंत में immunoperoxidase धारावाहिक dilutions का उपयोग करने के लिए वायरल टिटर निर्धारित परख.

Abstract

संक्रामक वायरल titers की गणना एक बुनियादी और आवश्यक virologists के लिए प्रयोगात्मक दृष्टिकोण का प्रतिनिधित्व करता है. शास्त्रीय पट्टिका assays वायरस है कि महत्वपूर्ण cytopathic प्रभाव है, जो मानव coronavirus (HCoV) के 229E उपभेदों और OC43 के लिए मामला है कारण नहीं है के लिए नहीं किया जा सकता है. पता लगाने और इन वायरस के अनुमापन के लिए एक वैकल्पिक अप्रत्यक्ष immunoperoxidase परख (आईपीए) इस के साथ साथ वर्णित है. अतिसंवेदनशील कोशिकाओं के नमूने के एक 96 अच्छी तरह से थाली में सीरियल लघुगणक dilutions के साथ inoculated हैं. वायरल विकास के बाद, आइपीए द्वारा वायरल पता लगाने संक्रामक वायरस टिटर, "टिशू कल्चर संक्रामक खुराक" (TCID50) के रूप में व्यक्त की पैदावार. यह वायरस युक्त एक नमूना है जिस पर प्रयोगशाला कुओं की एक श्रृंखला के आधा नकल वायरस होते हैं के कमजोर पड़ने का प्रतिनिधित्व करता है. इस तकनीक जैविक नमूनों में HCoV के अनुमापन (कोशिकाओं, ऊतकों, या तरल पदार्थ) के लिए एक विश्वसनीय विधि है.

Protocol

इस प्रयोगात्मक दृष्टिकोण के लिए पूर्ण पाठ प्रोटोकॉल में उपलब्ध है स्प्रिंगर प्रोटोकॉल .