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Techniques d'imagerie Ca 2 + Signalisation dans le sperme humain
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm
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Techniques d'imagerie Ca 2 + Signalisation dans le sperme humain

DOI:
10.3791/1996-v

•

07:38 min

•

June 16, 2010

•

, , , , , , , ,
1School of Biosciences,University of Birmingham, 2School of Medicine,University of Birmingham, 3Centre for Human Reproductive Science,Birmingham Women’s Hospital

Chapters

  • 00:00Title
  • 00:50Introduction
  • 01:26Preparation and Staining of Sperm Cells
  • 04:32Imaging Sperm Intracellular Ca Signals
  • 06:20Single-cell Fluorescence Intensity Data and its Relationship to Free Calcium
  • 07:06Conclusion

Summary

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Stimulation évoqués [Ca<sup> 2 +</sup>] I signaux de sperme humain individuelles sont évaluées. Cellules mobiles sont chargés avec du Ca<sup> 2 +</sup> Sensibles colorant fluorescent (AM-ester méthode) et immobilisé dans une chambre perfusable. Les cellules sont imagées par time-lapse de microscopie par fluorescence et stimulé via le milieu de perfusion. Les réponses des cellules simples (ou régions) sont analysés hors ligne en utilisant Excel.

Tags

Fluorescence MicroscopyCa2+ SignalingHuman SpermFluorescent DyesLoading MethodPhysiological StimulationCapacitating ConditionsAM EsterCytoplasmVisible Wavelength DyesRatiometric RecordingAdvantages And DisadvantagesImaging ChamberPoly-D-lysine Coated CoverslipPerfusion ApparatusTime-lapse AcquisitionRegions Of InterestData Normalization

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