Encyclopedia of Experiments: Biology
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- टाइप 1 डायबिटीज मेलिटस एक मानव रोग है जिसमें प्रतिरक्षा प्रणाली अग्न्याशय में बीटा कोशिकाओं को बनाने वाले इंसुलिन को नष्ट कर देती है। स्ट्रेप्टोजोसिन जेब्राफिश में टाइप 1 डायबिटीज मेलिटस को प्रेरित कर सकता है। 2- फेनोक्सीथेनॉल के घोल में मछली को एनेस्थेटाइज करें। 2- फेनोक्सीथेनॉल के घोल में मछली को लें और उसे पेट्री डिश पर रखें, वेंट्रल साइड ऊपर की ओर आ रहा है। 0.35 मिलीग्राम प्रति ग्राम मछली के वजन के आधार पर स्ट्रेप्टोजोसिन की खुराक की गणना करें और इसे खारा समाधान में फैलाएं।
जेब्राफिश के वेंट्रल साइड पर पेल्विक कर्डल के नीचे इंट्रापेरिटोनियल इंजेक्शन द्वारा स्ट्रेप्टोजोसिन को प्रशासित करें। स्ट्रेप्टोजोसिन संरचनात्मक रूप से एन-एसिटाइलग्लूस्कोसामाइन के समान है, जो एक लिगामेंट है जो अग्नाशय बीटा कोशिकाओं पर ग्लूट2 रिसेप्टर को बांधता है, जिससे इंसुलिन का स्राव होता है। इस प्रकार, स्ट्रेप्टोजोसिन अग्नाशय बीटा कोशिकाओं पर मौजूद ग्लूटा 2 रिसेप्टर्स को बांधता है जो इसे कोशिकाओं के अंदर परिवहन करते हैं।
बीटा कोशिकाओं में प्रवेश करने पर, स्ट्रेप्टोजोसिन एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को ट्रिगर करता है जिससे ऑटोएंटीजन की रिहाई होती है। ऑटोएंटीजन प्रतिरक्षा प्रणाली को विदेशी के रूप में बीटा कोशिकाओं को पहचानने और उन्हें नष्ट करने का कारण बनते हैं जिससे इंसुलिन का स्तर कम हो जाता है। तीन और पांच दिनों में स्ट्रेप्टोजोसिन की बार-बार खुराक दिलाई जाती है, इसके बाद साप्ताहिक खुराक, हर सात दिन में प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया बनाए रखने के लिए।
निम्नलिखित उदाहरण में, हम टाइप 1 मधुमेह मेलिटस का एक ज़ेब्राफ़िश मॉडल उत्पन्न करेंगे। मधुमेह के साथ जेब्राफिश उत्पन्न करने के लिए, सामान्य मछली के पानी के साथ एक रिकवरी टैंक तैयार करें और मछली के पानी के एक संवेदनाहारी टैंक को 2-फेनोक्सीथेनॉल के 1 से 1,000 कमजोर पड़ने के साथ तैयार करें। एक धुएं के हुड के तहत, स्ट्रेप्टोजोसिन या एसटीजेड के 6 मिलीग्राम को जोड़कर स्ट्रेप्टोजोसिन या एसटीजेड का 0.3% समाधान तैयार करें 0.09% सोडियम क्लोराइड के 2 मिलीलीटर में जोड़कर और तुरंत समाधान रखें।
एक अलग ट्यूब में, मछली को नियंत्रित करने के लिए पर्याप्त खारा अलीकोट करें। 27 और 1/2 गेज सुई से लैस आधा सीसी सिरिंज एसटीजेड या कंट्रोल सॉल्यूशंस के साथ भरें, यह सुनिश्चित करते हुए कि हवा के बुलबुले न फंस जाएं । एनेस्थेटाइज एक ही मछली को एनेस्थेटिक पानी में रखकर और तैराकी की गति समाप्त होने तक इंतजार करने से लगभग एक से दो मिनट ।
एक बार एनेस्थेटाइज्ड होने के बाद किसी भी अतिरिक्त पानी को अवशोषित करने के लिए मछली को कागज के तौलिये पर संक्षेप में रखें। फिर मछली को वजन वाली नाव में रखें और उसका वजन करें। इसके बाद मछली को एक फर्म की सतह पर रखें। फिर बेवेल के पिछले सुई को वेंट्रल पेरिटोनम के पीछे के पहलू में डालें और एसटीजेड के प्रति ग्राम 0.35 मिलीग्राम या नियंत्रण समाधान की बराबर मात्रा को फिश के पेरिटोनियल गुहा में इंजेक्ट करें।
इंजेक्शन के बाद, मछली को रिकवरी पानी की टंकी में रखें और सामान्य तैराकी गतिविधि के लिए निगरानी करें। प्रयोग के लिए पर्याप्त मछली इंजेक्शन लगाने के बाद, उन्हें सामान्य जीवित टैंकों में स्थानांतरित करें और 22 से 24 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर बनाए रखें। हाइपरग्लाइसेमिया के कुशल प्रेरण के लिए कम तापमान महत्वपूर्ण है। बहुत अधिक हाइपरग्लाइसेमिया की लंबी स्थिति को प्रेरित करने के लिए, प्रेरण चरण के दौरान लगातार इंजेक्शन की एक अनुसूची का पालन करें
