Single Oocyte Bisulfite Mutagenesis

Michelle M. Denomme; Liyue Zhang; Mellissa R.W. Mann

doi:10.3791/4046

Journal

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생물학

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単一の卵重亜硫酸塩の突然変異誘発

JoVE 신문
생물학

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JoVE 신문 생물학

Single Oocyte Bisulfite Mutagenesis

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単一の卵重亜硫酸塩の突然変異誘発

DOI:

10.3791/4046-v

•

13:18 min

•

June 27, 2012

•

Michelle M. Denomme^2,3, Liyue Zhang, Mellissa R.W. Mann^2,3

¹Department of Obstretrics & Gynaecology,Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario, ²Department of Biochemistry,Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario, ³Children’s Health Research Institute

Chapters

00:05Title
01:22Oocyte Collection
03:09Agarose Embedding and Lysis
04:41Bisulfite Mutagenesis
07:00First and Second Round PCR Amplification
09:09TA Cloning and Colony PCR
10:31Results: Electrophoretic Analysis of Single Oocyte Bisulfite Mutagenesis
12:40Conclusion

Summary

자동 번역

亜硫酸塩の突然変異誘発は、DNAメチル化を解析するためのゴールドスタンダードです。私たちの変更されたプロトコルは、単一細胞レベルでのDNAメチル化解析を可能にし、特に個々の卵のために設計されました。また、開裂段階の胚に使用することができます。

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