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Multi-Target-Parallel Processing Ansatz zur Gene-to-Struktur Bestimmung der Influenza Polymerase PB2-Untereinheit
JoVE 신문
면역학 및 감염병학
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Multi-target Parallel Processing Approach for Gene-to-structure Determination of the Influenza Polymerase PB2 Subunit
DOI:

22:10 min

June 28, 2013

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Chapters

  • 00:05Title
  • 02:20Construct Design
  • 04:07Polymerase Incomplete Primer Extension (PIPE) Cloning
  • 06:14Expression Optimization
  • 08:21Large Scale Fermentation
  • 09:40Protein Purification – Cell Lysis
  • 10:54Protein Purification – Affinity Chromatography
  • 13:04Protein Purification – Affinity Tag Cleavage
  • 14:47Protein Purification – Size-exclusion Chromatography (SEC)
  • 15:42Protein Crystallization
  • 17:03Crystal Harvesting
  • 18:15Crystal Screening/Data Collection
  • 19:27Results: 3D Structure Determination of Influenza Virus PB2
  • 21:05Conclusion

Summary

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Structure-based drug design spielt eine wichtige Rolle in der Medikamentenentwicklung. Verfolgen mehrere Ziele parallel erhöht die Chance auf Erfolg für Blei Entdeckung. Der folgende Artikel zeigt, wie die Seattle Structural Genomics Center for Infectious Disease eine Multi-Target-Ansatz für die Gen-to-Bestimmung der Struktur des Influenza-A-Untereinheit PB2 nutzt.

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