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定量荧光共振能量转移（福斯特共振能量转移）SENP1蛋白酶的动力学测定分析
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Quantitative FRET (Förster Resonance Energy Transfer) Analysis for SENP1 Protease Kinetics Determination
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定量荧光共振能量转移（福斯特共振能量转移）SENP1蛋白酶的动力学测定分析

DOI:
10.3791/4430-v

•

16:02 min

•

February 21, 2013

•

,
1Department of Bioengineering, Bourns College of Engineering,University of California, Riverside

Chapters

  • 00:05Title
  • 02:20Plasmid Constructs
  • 03:07Protein Expression and Purification
  • 06:16FRET-based Protease Assay for Enzyme Kinetic Study
  • 08:54Quantitative FRET Spectrum Analysis
  • 13:36Representative Results
  • 15:11Conclusion

Summary

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涉及的FRET（福斯特共振能量转移）信号的定量分析酶动力学研究的一种新方法。<em> K<sub> M</sub</em>和<em> K<sub>猫</sub</em> SENP1（SUMO / Sentrin特定的蛋白酶1）预SUMO1（小泛素样修饰）的催化结构域的水解获得。这个定量的基于FRET的蛋白酶动力学研究的一般原则可以应用到其他的蛋白酶。

Tags

Quantitative FRET AnalysisF&246;rster Resonance Energy TransferSENP1 Protease Kinetics DeterminationPosttranslational ModificationsUbiquitinUbiquitin-like ProteinsProtein Activity RegulationSUMO ModificationCellular ProcessesSUMO-specific ProteaseEndopeptidaseIsopeptidaseCatalytic EfficiencySpecificityKinetic ConstantsKcat/KM RatioMethods For Determining Kinetic ParametersPolyacrylamide Gel-based Western-blotRadioactive-labeled SubstrateFluorescent CompoundProtein Labeled Substrate

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