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Chapters
- 00:05Title
- 02:20Plasmid Constructs
- 03:07Protein Expression and Purification
- 06:16FRET-based Protease Assay for Enzyme Kinetic Study
- 08:54Quantitative FRET Spectrum Analysis
- 13:36Representative Results
- 15:11Conclusion
Une nouvelle méthode qui analyse quantitative de FRET (Förster Resonance Energy Transfer) des signaux est décrite pour l'étude de la cinétique enzymatique.<em> K<sub> M</sub</em> Et<em> K<sub> Cat</sub</em> Ont été obtenus pour l'hydrolyse du domaine catalytique de SENP1 (SUMO / sentrine protéase spécifique 1) de pré-SUMO1 (Small Ubiquitin-comme modificateur). Les principes généraux de cette étude quantitative-FRET à base de protéase cinétique peut être appliquée à d'autres protéases.
Tags
Quantitative FRET AnalysisF&246;rster Resonance Energy TransferSENP1 Protease Kinetics DeterminationPosttranslational ModificationsUbiquitinUbiquitin-like ProteinsProtein Activity RegulationSUMO ModificationCellular ProcessesSUMO-specific ProteaseEndopeptidaseIsopeptidaseCatalytic EfficiencySpecificityKinetic ConstantsKcat/KM RatioMethods For Determining Kinetic ParametersPolyacrylamide Gel-based Western-blotRadioactive-labeled SubstrateFluorescent CompoundProtein Labeled Substrate
