JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다. 전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.
Chapters
- 00:05Title
- 02:20Plasmid Constructs
- 03:07Protein Expression and Purification
- 06:16FRET-based Protease Assay for Enzyme Kinetic Study
- 08:54Quantitative FRET Spectrum Analysis
- 13:36Representative Results
- 15:11Conclusion
एक उपन्यास विधि झल्लाहट (Forster प्रतिध्वनि ऊर्जा हस्तांतरण) संकेतों के मात्रात्मक विश्लेषण शामिल एंजाइम कैनेटीक्स का अध्ययन करने के लिए वर्णित है.<em> कश्मीर<sub> पुरूष</sub</em> और<em> कश्मीर<sub> बिल्ली</sub</em> पूर्व SUMO1 (लघु आपरिवर्तक Ubiquitin तरह) के लिए उत्प्रेरक SENP1 (सूमो Sentrin / विशिष्ट protease 1) डोमेन की hydrolysis के लिए प्राप्त किया गया. इस protease मात्रात्मक झल्लाहट आधारित गतिज अध्ययन के सामान्य सिद्धांतों अन्य proteases के लिए लागू किया जा सकता है.
Tags
Quantitative FRET AnalysisF&246;rster Resonance Energy TransferSENP1 Protease Kinetics DeterminationPosttranslational ModificationsUbiquitinUbiquitin-like ProteinsProtein Activity RegulationSUMO ModificationCellular ProcessesSUMO-specific ProteaseEndopeptidaseIsopeptidaseCatalytic EfficiencySpecificityKinetic ConstantsKcat/KM RatioMethods For Determining Kinetic ParametersPolyacrylamide Gel-based Western-blotRadioactive-labeled SubstrateFluorescent CompoundProtein Labeled Substrate
