JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다. 전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.
Chapters
- 00:05Title
- 02:20Plasmid Constructs
- 03:07Protein Expression and Purification
- 06:16FRET-based Protease Assay for Enzyme Kinetic Study
- 08:54Quantitative FRET Spectrum Analysis
- 13:36Representative Results
- 15:11Conclusion
Новый метод с участием количественный анализ FRET (Ферстер резонансный перенос энергии) сигналов описано для изучения кинетики ферментов.<em> K<sub> M</sub</em> И<em> К<sub> Кот</sub</em> Были получены для гидролиза каталитический домен SENP1 (SUMO / Sentrin специфической протеазы 1) предварительно SUMO1 (Small Убиквитин-как модификатор). Общие принципы количественного лада на основе исследования кинетической протеазы могут быть применены в других протеаз.
Tags
Quantitative FRET AnalysisF&246;rster Resonance Energy TransferSENP1 Protease Kinetics DeterminationPosttranslational ModificationsUbiquitinUbiquitin-like ProteinsProtein Activity RegulationSUMO ModificationCellular ProcessesSUMO-specific ProteaseEndopeptidaseIsopeptidaseCatalytic EfficiencySpecificityKinetic ConstantsKcat/KM RatioMethods For Determining Kinetic ParametersPolyacrylamide Gel-based Western-blotRadioactive-labeled SubstrateFluorescent CompoundProtein Labeled Substrate
