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Méthode de mesure de l'activité des enzymes de dé-ubiquitination dans des lignées cellulaires et des échantillons de tissus
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JoVE 신문 생물학
Method for Measuring the Activity of Deubiquitinating Enzymes in Cell Lines and Tissue Samples
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Méthode de mesure de l'activité des enzymes de dé-ubiquitination dans des lignées cellulaires et des échantillons de tissus

DOI:
10.3791/52784-v

•

09:45 min

•

May 10, 2015

•

, , , , ,
1Department of Neuroscience,University of Minnesota, 2Institute for Translational Neuroscience,University of Minnesota, 3Department of Obstetrics, Gynecology, and Women’s Heath,University of Minnesota, 4Masonic Cancer Center,University of Minnesota

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:09Culturing Cells for the Experiment
  • 02:24Cell Harvesting and Cell Lysis
  • 04:40Sample Derivatization
  • 06:03Western Blot
  • 07:42Results: Analysis of Deubiquinating Enzyme Activity
  • 09:07Conclusion

Summary

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Le protocole actuel détaille un procédé pour mesurer l'activité des enzymes fonctionnellement homologue désubiquitination. Sondes spécialisées modifier de manière covalente l'enzyme et permettent de détecter. Cette méthode a le potentiel d'identifier de nouvelles cibles thérapeutiques.

Tags

Deubiquitinating EnzymesUbiquitin-proteasome SystemCell LinesActivity AssayProteasomal DegradationActive Site ProbesEnzyme ActivityExpressionCell DisruptionPathologiesNeurodegenerative DiseasesCancer

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