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Analisi di SCAP<em> N</em> -glycosylation E il traffico nelle cellule umane
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JoVE 신문 생물학
Analysis of SCAP N-glycosylation and Trafficking in Human Cells
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Analisi di SCAP<em> N</em> -glycosylation E il traffico nelle cellule umane

DOI:
10.3791/54709-v

•

11:27 min

•

November 08, 2016

•

, , , , , ,
1Department of Radiation Oncology,The Ohio State University Comprehensive Cancer Center and College of Medicine

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:05Detection of Endogenous SCAP Protein in Human Cells
  • 04:11Analysis of SCAP N-glycosylation in Human Cells
  • 07:15Detection of SCAP Trafficking from ER to Golgi Using GFP-SCAP in Human Cells
  • 09:07Results: SCAP Trafficking from ER to Golgi
  • 10:43Conclusion

Summary

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Descriviamo un metodo modificato per l'isolamento frazione di membrana da cellule umane e preparazione del campione per la rilevazione di -glycosylation SCAP N e proteine totali mediante western blot. Introduciamo inoltre un metodo GFP-etichettatura per monitorare il traffico di SCAP usando la microscopia confocale. Questo protocollo può essere utilizzato in laboratori di biologia regolare.

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Keywords: SCAPN-glycosylationTraffickingHuman CellsSREBPLipid MetabolismPNGaseU87 CellsCell Membrane FractionsNuclear ExtractsSDS-PAGEWestern BlotBradford Protein Assay

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