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Um protocolo otimizado para a mobilidade eletroforética ensaio de desvio usando oligonucleotídeos Infrared corante fluorescente-etiquetados
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JoVE 신문 생화학
An Optimized Protocol for Electrophoretic Mobility Shift Assay Using Infrared Fluorescent Dye-labeled Oligonucleotides

Um protocolo otimizado para a mobilidade eletroforética ensaio de desvio usando oligonucleotídeos Infrared corante fluorescente-etiquetados

DOI:
10.3791/54863-v

•

09:58 min

•

November 29, 2016

•

, ,
1Department of Biological Sciences,University of Illinois at Chicago

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:32Preparation of Gel, Infrared Fluorescent Dye-labeled Probes and Unlabeled Probes
  • 04:49Binding Reaction and Electrophoresis
  • 06:37Imaging
  • 07:35Results: Electrophoretic Mobility Shift Assays Using Purified Proteins and Dye-labeled DNA Probes
  • 08:57Conclusion

Summary

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Descrevemos aqui um protocolo otimizado de ensaios fluorescentes eletroforética de desvio de mobilidade (Femsa) usando SOX-2 proteínas purificadas em conjunto com sondas de DNA infravermelhos fluorescentes marcadas com corante como um estudo de caso para resolver uma questão biológica importante.

Tags

Electrophoretic Mobility Shift AssayInfrared Fluorescent DyeOligonucleotidesProtein-DNA InteractionsMolecular Biology생화학Non-radioactive ProbesNative Polyacrylamide GelTBE BufferGlycerolAnnealingDouble-stranded DNA ProbesKlenow FragmentEDTAPCRUnlabeled Probes

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