JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다. 전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.
Chapters
- 00:05Title
- 01:02Primer Design for PCR Amplification of Gene Flanks
- 02:49Production of OSCAR Constructs
- 05:48Agrobacterium tumefaciens Mediated Transformation (ATMT) of Fungi
- 07:45Deletion Mutant Identification by PCR
- 08:53Results: The OSCAR Method Generates a Gene Deletion Plasmid for Fungi in a Single Reaction
- 10:23Conclusion
Mutanti di delezione genica generati attraverso la ricombinazione omologa sono il gold standard per gli studi di funzione genica. Viene descritto il metodo OSCAR (costruzione di una fase di Agrobacterium-Recombination-ready-plasmids) per una rapida generazione di costrutti di delezione. La trasformazione fungina mediata da Agrobacterium segue. Infine, viene presentato un metodo di conferma basato su PCR delle delezioni geniche nei trasformanti fungini.
