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Chapters
- 00:05Title
- 01:02Primer Design for PCR Amplification of Gene Flanks
- 02:49Production of OSCAR Constructs
- 05:48Agrobacterium tumefaciens Mediated Transformation (ATMT) of Fungi
- 07:45Deletion Mutant Identification by PCR
- 08:53Results: The OSCAR Method Generates a Gene Deletion Plasmid for Fungi in a Single Reaction
- 10:23Conclusion
Os mutantes de deleção de genes gerados através da recombinação homóloga são o padrão-ouro para estudos de função gênica. O método OSCAR (One Step Construction of Agrobacterium-Recombination-ready-plasmids) para a geração rápida de construções de exclusão é descrito. A transformação fúngica mediada por Agrobacterium segue. Finalmente, é apresentado um método de confirmação baseado em PCR de deleções genéticas em transformantes fúngicos.
