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Rekombinante Protein Expression, Kristallisation und biophysikalische Studien von a<em> Bacillus</em> -konservierte Nucleotid-Pyrophosphorylase, BcMazG
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생화학
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JoVE 신문 생화학
Recombinant Protein Expression, Crystallization, and Biophysical Studies of a Bacillus-conserved Nucleotide Pyrophosphorylase, BcMazG
DOI:

12:23 min

May 16, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 00:55Recombinant Protein Production and Purification of rBC1531
  • 04:47Removal of Affinity Tags by Thrombin Proteolysis
  • 06:32Crystallization Screening and Optimization of rBC1531
  • 07:30Colorimetric NTPase Assay
  • 08:33Results: Purification, Characterization, and Crystallization of rBC1531
  • 10:31Conclusion

Summary

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Bacillus anthracis ist der obligatorische Erreger der tödlichen Inhalations-Milzbrand, so dass Studien über seine Gene und Proteine ​​streng reguliert sind. Ein alternativer Ansatz ist es, orthologe Gene zu untersuchen. Wir beschreiben biophysikochemische Studien eines B. anthracis ortholog in B. cereus , bc1531, die minimale experimentelle Ausrüstung erfordern und keine ernsthaften Sicherheitsbedenken haben.

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