June 1st, 2017
전통적인 슬랩 젤 전기 영동 (SGE) 실험은 복잡한 장치와 높은 화학 물질 소비가 필요합니다. 이 연구는 단시간 내에 DNA 단편을 분리하는 저비용 방법을 설명하는 프로토콜을 제시합니다.
이 구절은 SNAP 겔 전기영동에 대한 새로운 시스템을 소개합니다. 이 시스템은 화학적 개념 실험 시간을 크게 단축할 수 있을 뿐만 아니라 스마트폰으로 아가로스 겔 분리에서 실시간 추적을 실현할 수 있습니다. 그 3개의 그림은 50, 100 및 1의 사다리에 있는 기본적인 쌍의 젤 전기 이동법 후에 전형적인 결과를 대표한다.
각 DNA 단편은 잘 분리되었습니다. SNAP 젤 전기 이동법은 DNA 단편 별거를 위한 가장 발명적인 방법이고, 그러므로, 생화학적이고 생물학 분석에 있는 배 가정교사로 간주됩니다. 이번에는 SNAP gel 전기 영동 실험에 대한 새로운 방법을 보여 드리겠습니다.
자, 시작하겠습니다. 먼저, 0.1g의 아가로스 젤의 무게를 측정하여 플라스크에 넣고, TPE 버퍼를 플라스크에 넣습니다. 준비된 용액의 부피는 플라스크 용량의 1/3을 넘지 않아야 합니다.
플라스크를 방부제 흄으로 밀봉 한 다음 아가로 오스 완충액 혼합물을 전자 레인지로 가열했습니다. 플라스크를 전자레인지에 넣기 전에 폭발 시 방부제 흄에 구멍을 뚫습니다. 장착된 아가로스 용액을 SNAP 젤 전기영동 튜브의 채널에 고정합니다.
빗을 용액에 놓습니다. 장착된 용액은 냉각되고 몇 분 후에 실온에서 겔 상태가 됩니다. 빗에서 꺼내 우물을 만들고 TBE 버퍼를 추가합니다.
DNA 단편의 움직임 상태를 스마트폰으로 관찰할 수 있는 간단한 실시간 추적 DNA 단편 분리 시스템을 구축하였습니다. 먼저 DNA ladder를 SYBR Green One과 원심분리기로 혼합합니다. 혼합물을 아가로스 젤의 웰에 넣습니다.
둘째, LED 광원을 켜고 LED 위에 대역 통과 필터를 배치한 다음 전극을 칩의 두 레인에 넣습니다. 그런 다음 그 위에 다른 대역 통과 필터를 놓습니다. 전원을 기다립니다.
전기 와트를 180와트로 설정합니다. 스마트폰을 켜서 DNA 단편 분리 과정을 기록하세요. 예를 들어, 스마트폰을 사용하여 50개 염기쌍 DNA ladder의 분리를 추적합니다.
SNAP 젤 전기영동은 DNA 단편 분리를 위한 가장 효과적인 방법입니다. 그러나 중단된 실험은 SNAP 겔 전기영동이 문제의 전체 길이에 의해 제한되었음을 나타냅니다. 첫째, 분리에는 몇 시간, 심지어 며칠이 걸립니다.
둘째: 화학적 인식이 매우 높습니다. 셋 : 많은 장치가 필요하기 때문에. 4: 젤 화상 진찰 체계는 실험이 끝날 때만 분리된 DNA 파편을 관찰할 수 있습니다.
또한, SNAP 겔 전기영동에 일반적으로 사용되는 이리듐과 브롬은 돌연변이 유발 및 암성입니다. 실험 후 각 DNA 단편을 잘 분리했습니다. 또한, SNAP 겔 전기영동 칩의 4개 채널에서 동일한 샘플을 분리했으며, 각 실험에서 DNA 단편이 동일한 크기이고 동일한 거리로 이동했다는 문제가 있습니다.
그림에서 DNA 단편은 잘 분리되었으나 그림에서는 DNA 단편이 흰색으로 보이지만 칩의 매개 변수와 아가로 B.It 젤의 농도를 최적화하여 개선할 수 있습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 SNAP 젤 전기영동에 대한 새로운 메시지를 확인해야 합니다. 또한 생성된 DNA 조각은 흰색으로 보입니다.
이는 SNAP gel 전기영동 칩의 매개변수와 agarose gel의 농도를 최적화하여 개선할 수 있습니다. 중요한 점은 고전압이 필요하고 시약이 될 수 있기 때문에 섭취하는 동안 매우 조심해야 한다는 것입니다.
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이 기사는 DNA 단편 분리를 위한 새로운 방법인 SNAP 겔 전기영동에 대해 소개합니다. 이 시스템은 화학 물질 사용량과 실험 시간을 크게 줄입니다. 시스템을 사용하면 스마트폰을 사용하여 DNA 분리를 실시간으로 추적할 수 있습니다.