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Eficiente generación y edición de IPSCs alimentador-libre de las células pancreáticas humanas utilizando el sistema CRISPR Cas9
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JoVE 신문 생체공학
Efficient Generation and Editing of Feeder-free IPSCs from Human Pancreatic Cells Using the CRISPR-Cas9 System
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Eficiente generación y edición de IPSCs alimentador-libre de las células pancreáticas humanas utilizando el sistema CRISPR Cas9

DOI:
10.3791/56260-v

•

09:16 min

•

November 08, 2017

•

, ,
1Department of Animal and Avian Sciences,University of Maryland, 2Animal Bioscience and Biotechnology Laboratory, ARS,USDA, 3NIH Stem Cell Unit, Bethesda,National Institutes of Health, 4RenOVAte Biosciences Inc

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:52Generation of Human iPSCs from Primary Human Pancreatic Cells
  • 03:41Genome Editing of iPSC Using CRISPER-Cas9
  • 05:45Single-cell Isolation of Targeted hiPSCs
  • 07:15Results: Editing of Feeder-free iPSCs with CRISPER-Cas9 System
  • 08:29Conclusion

Summary

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Este protocolo se describe en detalle la generación de células libres de huella pluripotentes inducidas (iPSCs) de las células pancreáticas humanas en condiciones libres de alimentador, seguido de edición utilizando ribonucleoproteínas CRISPR/Cas9 y caracterización de la modificación sola célula clones.

Tags

Induced Pluripotent Stem CellsIPSCsCRISPR-Cas9Genome EditingFeeder-freeHuman Pancreatic CellsSendai VirusCell ReprogrammingCell CloningMEFsMTeSR1Matrix MembraneCell Culture

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