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Utilizando un sistema de enriquecimiento integral inmunoprecipitación para identificar un perfil endógeno modificación poste-de translación de proteínas blanco
JoVE 신문
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JoVE 신문 생화학
Utilizing a Comprehensive Immunoprecipitation Enrichment System to Identify an Endogenous Post-translational Modification Profile for Target Proteins
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Utilizando un sistema de enriquecimiento integral inmunoprecipitación para identificar un perfil endógeno modificación poste-de translación de proteínas blanco

DOI:
10.3791/56912-v

•

08:12 min

•

January 08, 2018

•

, ,
1R&D Department,Cytoskeleton Inc.

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:59Sample Preparation: Cell Culture
  • 02:56Immunoprecipitation (IP) Assay
  • 07:00Results: Sample Preparation and IP Enrichment for PTM Detection and Crosstalk Investigation
  • 07:43Conclusion

Summary

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Investigando múltiples, modificaciones post-traduccionales endógenas para una proteína de la blanco pueden ser extremadamente difíciles. Técnicas descritas aquí utilizan un sistema de buffer y filtro de lisis optimizado desarrollado con metas específicas de PTM, matrices de afinidad para detectar las modificaciones de fosforilación de tirosina, acetilación, ubiquitinación y sumoilación 2/3 para un objetivo proteína mediante un sistema único y aerodinámico.

Tags

ImmunoprecipitationPTMPost-translational ModificationCell SignalingLysateBlaster FilterProtein QuantitationA431 CellsLysis BufferDNA Removal

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