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Utilisant un système d’enrichissement immunoprécipitation complète afin d’identifier un profil endogène Modification post-traductionnelle des protéines cibles
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Utilizing a Comprehensive Immunoprecipitation Enrichment System to Identify an Endogenous Post-translational Modification Profile for Target Proteins
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Utilisant un système d’enrichissement immunoprécipitation complète afin d’identifier un profil endogène Modification post-traductionnelle des protéines cibles

DOI:
10.3791/56912-v

•

08:12 min

•

January 08, 2018

•

, ,
1R&D Department,Cytoskeleton Inc.

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:59Sample Preparation: Cell Culture
  • 02:56Immunoprecipitation (IP) Assay
  • 07:00Results: Sample Preparation and IP Enrichment for PTM Detection and Crosstalk Investigation
  • 07:43Conclusion

Summary

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Enquêtes multiples, des modifications post-traductionnelles endogènes pour une protéine cible peuvent être extrêmement difficiles. Utilisent les techniques décrites ici un système tampon et de filtre de lyse optimisé développé avec PTM-ciblage spécifique, des matrices d’affinité afin de détecter les modifications de la phosphorylation acétylation, ubiquitination, SUMOylation 2/3 et de la tyrosine pour une cible protéine à l’aide d’un système unique et simplifié.

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Keywords: ImmunoprecipitationPTMPost-translational ModificationCell SignalingLysateBlaster FilterProtein QuantitationA431 CellsLysis BufferDNA Removal

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