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생화학

Crescimento de cristais de proteína com dimensões distintas usando automatizado cristalização juntamente com In Situ Difusão dinâmica da luz

JoVE 신문
생화학

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JoVE 신문 생화학

Growing Protein Crystals with Distinct Dimensions Using Automated Crystallization Coupled with In Situ Dynamic Light Scattering

Crescimento de cristais de proteína com dimensões distintas usando automatizado cristalização juntamente com In Situ Difusão dinâmica da luz

DOI:

10.3791/57070-v

•

09:15 min

•

August 14, 2018

•

Daniela Baitan², Robin Schubert³, Arne Meyer, Karsten Dierks, Markus Perbandt³, Christian Betzel³

¹Xtal Concepts GmbH, ²Institute for Biochemistry and Molecular Biology, Laboratory for Structural Biology of Infection and Inflammation c/o DESY,University of Hamburg, ³The Hamburg Center for Ultrafast Imaging,University of Hamburg

Chapters

00:04Title
00:56Parameters, Solution Setup, and Micro-dosage Systems Adjustment
02:42Seeing a Thaumatin Drop in the Experimental Chamber and in Situ Measurements
04:48Sample Evaporation, Precipitant Addition, and Tracking the Evolution of the Crystallization Droplet Over Time
06:12Recovery of Crystallization Droplet
07:09Results: Formation of Protein Microcrystals from T. daniellii Thaumatin
07:57Conclusion

Summary

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Aqui nós apresentamos um protocolo para a produção controlada de microcristais de proteína. O processo usa um dispositivo automatizado permitindo manipulação controlada de vários parâmetros de cristalização. A cristalização de proteínas é realizada pela adição de automatizado e controlada de soluções de cristalização ao monitoramento e investigar a distribuição de raio de partículas em gota a cristalização.

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Microcristalografia de Cristais de Proteína e<em> Em Cellulo</em> Difração

Cromatografia de troca iónica (IEX) acoplada ao multi-ângulo espalhamento de luz (MALS) para caracterização e separação de proteínas

Caracterização de proteínas por cromatografia de exclusão de tamanho acoplada ao espalhamento de luz Multiangulares (SEC-MALS)

Purificação de Afinidade MS2 juntamente com sequenciamento de RNA em bactérias gram-positivas

Derivatização de Cristais de Proteína com I3C usando Triagem de Matriz Microseada Aleatória

Otimizando o Crescimento de Cristais de Endotiapsina para Experimentos de Cristalografia Seriada

Metabolômica Quantitativa de Saccharomyces Cerevisiae Usando cromatografia líquida juntamente com espectrometria de massa tandem

Ensaio Pulldown Juntamente com Co-Expressão em Células de Bactérias como uma Ferramenta Eficiente em Tempo para Testar Interações Desafiadoras Proteína-Proteína