CRISPR-mediated Loss of Function Analysis in Cerebellar Granule Cells Using <em>In Utero</em> Electroporation-based Gene Transfer

Weijun Feng; Lena Herbst; Peter Lichter; Stefan M. Pfister; Hai-Kun Liu; Daisuke Kawauchi

doi:10.3791/57311

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Utero Electroporation में प्रयोग अनुमस्तिष्क दाना कोशिकाओं में समारोह विश्लेषण के CRISPR-मध्यस्थता हानि-आधारित जीन स्थानांतरण

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CRISPR-mediated Loss of Function Analysis in Cerebellar Granule Cells Using In Utero Electroporation-based Gene Transfer

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Utero Electroporation में प्रयोग अनुमस्तिष्क दाना कोशिकाओं में समारोह विश्लेषण के CRISPR-मध्यस्थता हानि-आधारित जीन स्थानांतरण

DOI:

10.3791/57311-v

•

09:39 min

•

June 09, 2018

•

Weijun Feng*¹, Lena Herbst*², Peter Lichter, Stefan M. Pfister^4,5, Hai-Kun Liu, Daisuke Kawauchi⁴

¹Division of Molecular Neurogenetics,German Cancer Research Center (DKFZ), DKFZ-ZMBH Alliance, ²Division of Molecular Genetics,German Cancer Research Center (DKFZ), and German Cancer Consortium (DKTK), ³Hopp-Children’s Cancer Center at the NCT Heidelberg (KiTZ), ⁴Division of Pediatric Neurooncology,German Cancer Research Center (DKFZ), and German Cancer Consortium (DKTK), ⁵Department of Pediatric Hematology and Oncology,Heidelberg University Hospital

Chapters

00:04Title
01:30In Utero Electroporation
05:16Preparation of Cryosections from Electroporated Cerebella
06:22Immunostaining the Cerebellar Cryosections
07:38Results: Immunostained Cerebella from Rosa26-CAG-LSL-Cas9-P2A-EGFP Mouse
08:48Conclusion

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पारंपरिक नुकसान-की-समारोह जीन नॉकआउट जानवरों का उपयोग कर के अध्ययन अक्सर महंगा हो गया है और समय लेने वाली । Electroporation आधारित CRISPR-मध्यस्थता दैहिक mutagenesis vivo मेंजीन कार्यों को समझने के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है । यहां, हम सेरिबैलम के proliferating कोशिकाओं में नॉकआउट phenotypes का विश्लेषण करने के लिए एक विधि की रिपोर्ट ।

Utero Electroporation में प्रयोग अनुमस्तिष्क दाना कोशिकाओं में समारोह विश्लेषण के CRISPR-मध्यस्थता हानि-आधारित जीन स्थानांतरण

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