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CRISPR 중재 손실 함수 분석 소 뇌과 립 세포를 사용 하 여 Utero에서 Electroporation 기반 유전자 이동

JoVE 신문
발생학

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JoVE 신문 발생학

CRISPR-mediated Loss of Function Analysis in Cerebellar Granule Cells Using In Utero Electroporation-based Gene Transfer

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CRISPR 중재 손실 함수 분석 소 뇌과 립 세포를 사용 하 여 Utero에서 Electroporation 기반 유전자 이동

DOI:

10.3791/57311-v

•

09:39 min

•

June 09, 2018

•

Weijun Feng*¹, Lena Herbst*², Peter Lichter, Stefan M. Pfister^4,5, Hai-Kun Liu, Daisuke Kawauchi⁴

¹Division of Molecular Neurogenetics,German Cancer Research Center (DKFZ), DKFZ-ZMBH Alliance, ²Division of Molecular Genetics,German Cancer Research Center (DKFZ), and German Cancer Consortium (DKTK), ³Hopp-Children’s Cancer Center at the NCT Heidelberg (KiTZ), ⁴Division of Pediatric Neurooncology,German Cancer Research Center (DKFZ), and German Cancer Consortium (DKTK), ⁵Department of Pediatric Hematology and Oncology,Heidelberg University Hospital

Chapters

00:04Title
01:30In Utero Electroporation
05:16Preparation of Cryosections from Electroporated Cerebella
06:22Immunostaining the Cerebellar Cryosections
07:38Results: Immunostained Cerebella from Rosa26-CAG-LSL-Cas9-P2A-EGFP Mouse
08:48Conclusion

Summary

자동 번역

녹아웃 동물을 사용 하 여 유전자의 손실의 기능 연구를 기존의 자주 비용과 시간이 많이 소요 되었습니다. CRISPR 중재 체세포 mutagenesis Electroporation 기반 유전자에 vivo기능을 이해 하는 강력한 도구입니다. 여기, 우리는 소 뇌의 세포 증식에 녹아웃 고기를 분석 하는 방법을 보고 합니다.

Tags

CRISPR Loss Of Function Analysis Cerebellar Granule Cells In Utero Electroporation Gene Transfer Developmental Neuroscience Neuro-oncology Cerebellar Development Brain Tumor Formation Immunohistochemistry Knock-out Mouse Plasmid Fast Green

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