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タンパク質を安定化する方法: 熱安定性画面シフト試金およびナノ示差走査 X ウイルス プロジェクト/蛍光定量
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
How to Stabilize Protein: Stability Screens for Thermal Shift Assays and Nano Differential Scanning Fluorimetry in the Virus-X Project
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タンパク質を安定化する方法: 熱安定性画面シフト試金およびナノ示差走査 X ウイルス プロジェクト/蛍光定量

DOI:
10.3791/58666-v

•

07:22 min

•

February 11, 2019

•

, , ,
1Department of Biosciences,Durham University, 2Department of Chemistry,Durham University

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:27Preparation of Protein Sample
  • 01:31Performing a Thermal Shift Assay (TSA) Experiment
  • 03:22Preparing and Programing a Nano Differential Scanning Fluorimetry (nanoDSF) Experiment
  • 05:35Results: Analysis of the Temperature at the Inflection Point of the Unfolding Transition (Tm) in Lysozyme
  • 06:55Conclusion

Summary

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急速に熱ゲルシフト試金およびナノ示差走査/蛍光定量による条件の様々 なタンパク質の熱安定性をテストするためのプロトコルが表示されます。バッファー システム、塩・添加物、一緒には、構造と機能の研究の適切なバッファーを識別するために蛋白質の試金される 3 つのユニークな安定画面を構成します。

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Keywords: Protein StabilizationThermal Shift AssayNano Differential Scanning FluorimetryProtein ChemistryDrug DiscoveryStability ScreenProtein ThermostabilityProtein Ligand BindingHigh-throughputSYPRO Orange DyeRT-PCR SystemMelt Curve Analysis

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