In Situ Detection of Ribonucleoprotein Complex Assembly in the C. elegans Germline using Proximity Ligation Assay

Nicholas  J. Day; Xiaobo Wang; Ekaterina Voronina

doi:10.3791/60982

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In Situ Detection of Ribonucleoprotein Complex Assembly nella C. elegans Germline utilizzando Proximity Ligation Assay

JoVE 신문
발생학

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In Situ Detection of Ribonucleoprotein Complex Assembly in the C. elegans Germline using Proximity Ligation Assay

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In Situ Detection of Ribonucleoprotein Complex Assembly nella C. elegans Germline utilizzando Proximity Ligation Assay

DOI:

10.3791/60982-v

•

08:56 min

•

May 05, 2020

•

Nicholas J. Day, Xiaobo Wang, Ekaterina Voronina

¹Division of Biological Sciences,University of Montana

Chapters

00:04Introduction
00:49Dissection/Gonad Extrusion
02:46Fixation/Blocking
04:14Primary Antibody Incubation and PLA Probe (Secondary Antibody) Incubation
05:21Ligation
06:09Amplification and Final Washes
06:45Coverslip Mounting
07:15Results: Germlines Following Co-immunostaining or PLA
08:10Conclusion

Summary

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Questo protocollo dimostra l'uso del saggio di legatura di prossimità per sondare le interazioni proteina-proteina in situ nella germinale C. elegans.

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