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ルシファーゼベース成長アッセイを用いた細胞内トキソプラズマゴンディ成長に対する化学阻害剤の効率の測定
JoVE 신문
면역학 및 감염병학
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Determination of Chemical Inhibitor Efficiency against Intracellular Toxoplasma Gondii Growth Using a Luciferase-Based Growth Assay
DOI:

09:49 min

April 29, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:49Luciferase-Based ToxoplasmaGrowth Assay
  • 02:25Chemical Compound Inhibition Efficacy Evaluation
  • 04:08CRISPR-Cas9-Based Gene Deletion
  • 05:59Toxoplasma Transfection
  • 06:51Knockout Parasite Cloning
  • 08:06Results: Representative LHVS Inhibition Efficacy Against Intracellular Toxoplasma Growth
  • 09:22Conclusion

Summary

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ここで提示されるプロトコルは、ルシファーゼベースの増殖アッセイを用いたトキソプラズマゴンディの細胞内成長に対する化学化合物の阻害効果を評価するプロトコルである。この技術は、対応する標的遺伝子の遺伝的欠失による阻害特異性を確認するために用いられる。TgCPLプロテアーゼに対するLHVSの阻害を例として評価する。

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