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Chapters
- 00:04Introduction
- 00:42Short Tandem Target Mimic (STTM) Fragment Amplification
- 01:40STTM Purification
- 02:22T4 DNA Polymerase Reaction Mix Preparation
- 03:13Potato Virus X (PVX)-Based microRNA (miRNA) Silencing (VbMS) Vector Construction
- 04:55T4 DNA Polymerase Reaction Setup and STTM Cloning
- 07:21Potato Virus-X-Based VbMS Assay
- 10:07Results: Representative VbMS of miR165/166 in Tetraploid Potato Species
- 11:16Conclusion
Presentiamo un protocollo dettagliato per il sistema di silenziamento dei microRNA (VbMS) basato sul virus della patata X (PVX) per caratterizzare funzionalmente i microRNA endogeni (miRNA) nella patata. Le molecole mimiche bersaglio (TM) di miRNA di interesse sono integrate nel vettore PVX ed espresse transitoriamente in patata per silenziare il miRNA bersaglio o la famiglia di miRNA.
