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HiBiT CRISPR सेल लाइनों का उपयोग करके लक्षित प्रोटीन अवक्रमण यौगिकों की उच्च-थ्रूपुट सेलुलर प्रोफाइलिंग
JoVE 신문
암 연구학
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JoVE 신문 암 연구학
High-Throughput Cellular Profiling of Targeted Protein Degradation Compounds Using HiBiT CRISPR Cell Lines
DOI:

05:33 min

November 09, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:50Endpoint Degradation Studies with HiBiT CRISPR Target Proteins in Lytic Format with Optional Cell Viability Fluorescence Analysis
  • 03:07Results: Degradation Compound Analysis in a HiBiT CRISPR Cell Line
  • 04:51Conclusion

Summary

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यह प्रोटोकॉल जीवित कोशिकाओं में प्रोटीन डिग्रेडेशन कैनेटीक्स के मात्रात्मक लुमिनेसेंट डिटेक्शन का वर्णन करता है, जिसे एक लक्ष्य प्रोटीन से जुड़े एंटीबॉडी मुक्त अंतर्जात प्रोटीन डिटेक्शन टैग को व्यक्त करने के लिए सीआरआईएसपीआर / सीएएस 9 का उपयोग करके इंजीनियर किया गया है। मात्रात्मक गिरावट मापदंडों, दर, डीमैक्स, डीसी 50 और डीमैक्स50 की गणना और प्राप्तकरने के लिए विस्तृत निर्देश शामिल हैं।

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