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マラリアのアノフェレスベクターにおける部位特異的φC31媒介集積分とカセット交換

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유전학

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Site-Directed φC31-Mediated Integration and Cassette Exchange in Anopheles Vectors of Malaria

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マラリアのアノフェレスベクターにおける部位特異的φC31媒介集積分とカセット交換

DOI:

10.3791/62146-v

•

09:38 min

•

February 02, 2021

•

Adriana Adolfi², Amy Lynd, Gareth J. Lycett, Anthony A. James³

¹Vector Biology Department,Liverpool School of Tropical Medicine, ²Department of Microbiology & Molecular Genetics,University of California, ³Department of Molecular Biology & Biochemistry,University of California

Chapters

00:04Introduction
00:46Preparation of Plasmids for the Microinjection Mix
02:33Microinjection of Embryos from an Anopheles Docking Line
03:38Crossing and Screening of Transformed Individuals
06:45Results: Validation of φC31 Single Integration and RMCE in An. stephensi Larvae
08:56Conclusion

Summary

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このプロトコルは、φC31システムを使用してアノフェレスマラリア蚊のゲノムにおいて部位特異的修飾を達成する方法を記述している。記載される改変には、attP含有ドッキングラインのゲノムにおけるトランスジェニックカセットの統合および交換の両方が含まれる。

Tags

Keywords: Site-directed Integration AttB-mediated Integration Cassette Exchange Anopheles Malaria Transgenesis Transgenic Mosquitoes Embryo Microinjection Marker Gene Helper Plasmid Integrase

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