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Analyse der mechanoenzymatischen Eigenschaften prozessiver Myosine mit ultraschneller Kraftklemmenspektroskopie
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Dissecting Mechanoenzymatic Properties of Processive Myosins with Ultrafast Force-Clamp Spectroscopy
DOI:

09:38 min

July 01, 2021

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:47Optical Setup
  • 01:22Silica Beads Preparation
  • 03:24Trap Position, Power, and Stiffness Calibration
  • 04:53Sample Assembly
  • 05:54Sample Measurement and Actin‐Myosin Contact Establishment
  • 07:37Results: Position Recording and Force Inversion
  • 08:53Conclusion

Summary

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Hier wird ein umfassendes Protokoll zur Durchführung von ultraschnellen Kraftklemmexperimenten an prozessiven Myosin-5-Motoren vorgestellt, das leicht auf die Untersuchung anderer Klassen von prozessiven Motoren ausgeweitet werden könnte. Das Protokoll beschreibt alle notwendigen Schritte, von der Einrichtung der Versuchsapparatur über die Probenvorbereitung bis hin zur Datenerfassung und Analyse.

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