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Preparación de membrana plasmática a pequeña escala para el análisis de Candida albicans Cdr1-mGFPHis
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Small-Scale Plasma Membrane Preparation for the Analysis of Candida albicans Cdr1-mGFPHis
DOI:

09:44 min

June 13, 2021

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:57Growing and Harvesting Yeast Cells
  • 02:26Isolation of Plasma Membranes
  • 04:14Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE)
  • 06:22Results: Analysis of Cdr1-mGFPHis Isolated from Plasma Membranes of Saccharomyces cerevisiae
  • 09:06Conclusion

Summary

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Este artículo presenta un protocolo de aislamiento de membrana plasmática a pequeña escala para la caracterización de la proteína Cdr1 cdr1 de Candida albicans ABC (casete de unión a ATP), sobreexpresada en Saccharomyces cerevisiae. Se diseñó una doble etiqueta mGFPHis C-terminal escindible con una etiqueta doble de 16 residuos entre Cdr1 y la etiqueta para facilitar la purificación y la detección de detergente de Cdr1.

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