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칸디다 알비칸스 Cdr1-mGFPHis 분석을 위한 소규모 플라즈마 멤브레인 준비
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JoVE 신문 생물학
Small-Scale Plasma Membrane Preparation for the Analysis of Candida albicans Cdr1-mGFPHis
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칸디다 알비칸스 Cdr1-mGFPHis 분석을 위한 소규모 플라즈마 멤브레인 준비

DOI:
10.3791/62592-v

•

09:44 min

•

June 13, 2021

•

, , , , ,
1Sir John Walsh Research Institute, Faculty of Dentistry,University of Otago, 2Department of Microbiology, Faculty of Medicine,Chulalongkorn University, 3School of Biological Sciences,University of Auckland

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:57Growing and Harvesting Yeast Cells
  • 02:26Isolation of Plasma Membranes
  • 04:14Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE)
  • 06:22Results: Analysis of Cdr1-mGFPHis Isolated from Plasma Membranes of Saccharomyces cerevisiae
  • 09:06Conclusion

Summary

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이 문서는 칸디다 알비칸스 ABC (ATP 결합 카세트) 단백질 Cdr1의 특성화를위한 소규모 플라즈마 막 격리 프로토콜을 제시, 사카로미세스 cerevisiae에서 과발현. 프로테아제-클레이블 C-단말 mGFPCdr1과 태그 사이에 16잔류 링커를 장착한 이중 태그는 Cdr1의 정제 및 세제 스크리닝을 용이하게 하도록 설계되었습니다.

Tags

Plasma MembraneCandida AlbicansCdr1-mGFPHisMembrane ProteinSmall-scale IsolationATPaseDetergentCell HarvestingPre-cultureCell LysisCentrifugationHomogenization Buffer

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