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생물학

Secuenciación de transposon-inserción como herramienta para dilucidar factores de colonización bacteriana en un simbionte de gladiolos de Burkholderia de escarabajos lagria villosa

JoVE 신문
생물학

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JoVE 신문 생물학

Transposon-insertion Sequencing as a Tool to Elucidate Bacterial Colonization Factors in a Burkholderia gladioli Symbiont of Lagria villosa Beetles

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Secuenciación de transposon-inserción como herramienta para dilucidar factores de colonización bacteriana en un simbionte de gladiolos de Burkholderia de escarabajos lagria villosa

DOI:

10.3791/62843-v

•

09:55 min

•

August 12, 2021

•

Ramya Ganesan, Martin Kaltenpoth², Laura V. Flórez³

¹Department of Evolutionary Ecology, Institute of Organismic and Molecular Evolution,Johannes Gutenberg University, ²Department of Insect Symbiosis,Max Planck Institute for Chemical Ecology, ³Department of Plant and Environmental Sciences, Section for Organismal Biology,University of Copenhagen

Chapters

00:04Introduction
00:30Conjugation to Generate the Transposon Mutant Library
03:32Mutant Pool Infection on Beetle Eggs
04:43Sequencing Library Preparation
08:34Results: Transposon-insertion Sequencing as a Tool to Elucidate Bacterial Colonization Factors
09:11Conclusion

Summary

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Este es un método adaptado para identificar factores candidatos de colonización de insectos en un simbionte beneficioso de Burkholderia. El huésped escarabajo está infectado con una biblioteca mutante aleatoria generada a través de la mutagénesis del transposón, y la complejidad de la biblioteca después de la colonización se compara con un control cultivado in vitro.

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