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Tests de transfert d’énergie par résonance de Förster à résolution temporelle pour la mesure des protéines STAT phosphorylées endogènes dans les cellules humaines
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JoVE 신문 생화학
Time-resolved Förster Resonance Energy Transfer Assays for Measurement of Endogenous Phosphorylated STAT Proteins in Human Cells
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Tests de transfert d’énergie par résonance de Förster à résolution temporelle pour la mesure des protéines STAT phosphorylées endogènes dans les cellules humaines

DOI:
10.3791/62915-v

•

07:12 min

•

September 09, 2021

•

, ,
1BioAuxilium Research

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:02Stimulator or Inhibitor Titration Using the Two-Plate Assay Protocol with Adherent Cells
  • 04:33Results: Two-Plate and One-Plate Detection of STAT Proteins in Adherent and Suspension Cell Lines, and Intraplate Variability Study
  • 06:40Conclusion

Summary

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Les protocoles de dosage basés sur les cellules de transfert d’énergie de résonance de Förster résolues dans le temps sont décrits pour la quantification simple, spécifique, sensible et robuste du transducteur de signal phosphorylé endogène et de l’activateur de la transcription (STAT) 1/3/4/5/6 dans les lysats cellulaires dans un format de 384 puits.

Tags

Time-resolved FRETTR-FRETSTAT ProteinsJAK/STAT SignalingImmunoassayCell CultureCell StimulationCell LysisPhosphatase InhibitorsHigh-throughput ScreeningPharmacological Characterization

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