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체외 분석, 풀다운 및 샤프롱 분석을 사용한 히스톤 샤페론의 특성 분석

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JoVE 신문 생화학

In Vitro Characterization of Histone Chaperones using Analytical, Pull-Down and Chaperoning Assays

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체외 분석, 풀다운 및 샤프롱 분석을 사용한 히스톤 샤페론의 특성 분석

DOI:

10.3791/63218-v

•

08:16 min

•

December 29, 2021

•

Ruchir C. Bobde*^1,2, Ketul Saharan*^1,2, Somanath Baral³, Surajit Gandhi², Archana Samal², Rajivgandhi Sundaram, Ashish Kumar⁴, Ajit K. Singh⁵, Aritreyee Datta, Dileep Vasudevan

¹Institute of Life Sciences, ²Regional Centre for Biotechnology, ³School of Biotechnology,KIIT University, ⁴Department of Molecular Biophysics and Biochemistry,Yale University, ⁵Department of Pharmacology,University of Vermont College of Medicine

Chapters

00:05Introduction
01:04Competitive Pull-Down Assay
02:06Analytical Ultracentrifugation-Sedimentation Velocity (AUC-SV) Experiments
04:29Plasmid Supercoiling Assay to Confirm Histone Chaperoning Function
06:11Results: Characterization of Histone Chaperones Using Analytical, Pull-Down, and Chaperoning Assays
07:41Conclusion

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이 프로토콜은 히스톤 샤페론 올리고머화 및 안정성을 연구하기 위한 분석 크기 배제 크로마토그래피, 히스톤 샤페론-히스톤 상호작용을 밝히기 위한 풀다운 분석, 단백질 복합체의 화학량론을 분석하기 위한 AUC, 추정 히스톤 샤페론을 시험 관 내에서 기능적으로 특성화하기 위한 히스톤 샤페로닝 분석을 포함하는 일련의 방법을 설명합니다.

체외 분석, 풀다운 및 샤프롱 분석을 사용한 히스톤 샤페론의 특성 분석

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