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In vitro Charakterisierung von Histon-Chaperonen mittels analytischer, Pull-Down- und Chaperoning-Assays
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
In Vitro Characterization of Histone Chaperones using Analytical, Pull-Down and Chaperoning Assays
DOI:

08:16 min

December 29, 2021

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:04Competitive Pull-Down Assay
  • 02:06Analytical Ultracentrifugation-Sedimentation Velocity (AUC-SV) Experiments
  • 04:29Plasmid Supercoiling Assay to Confirm Histone Chaperoning Function
  • 06:11Results: Characterization of Histone Chaperones Using Analytical, Pull-Down, and Chaperoning Assays
  • 07:41Conclusion

Summary

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Dieses Protokoll beschreibt eine Reihe von Methoden, die eine analytische Größenausschlusschromatographie zur Untersuchung der Histon-Chaperon-Oligomerisierung und -stabilität, den Pull-Down-Assay zur Entschlüsselung von Histon-Chaperon-Histon-Interaktionen, die AUC zur Analyse der Stöchiometrie der Proteinkomplexe und den Histon-Chaperoning-Assay zur funktionellen Charakterisierung eines mutmaßlichen Histon-Chaperons in vitro umfassen.

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