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Motilità di singole molecole e cluster di Kinesin-5 Cin8 bidirezionale purificata da cellule S. cerevisiae
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JoVE 신문 생화학
Motility of Single Molecules and Clusters of Bi-Directional Kinesin-5 Cin8 Purified from S. cerevisiae Cells
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Motilità di singole molecole e cluster di Kinesin-5 Cin8 bidirezionale purificata da cellule S. cerevisiae

DOI:
10.3791/63425-v

•

10:46 min

•

February 02, 2022

•

, , , , , , , , , , ,
1Department of Chemistry,Ben-Gurion University of the Negev, Israel, 2Department of Biotechnology Engineering,Ben-Gurion University of the Negev, Israel

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:51Cin8 Overexpression and Purification from Saccharomyces cerevisiae Cells
  • 04:06Single-Molecule Motility Assay with the Purified Cin8
  • 06:29Motility Analysis
  • 09:13Results: Motility Characteristics of Different Cluster Sizes of Cin8 on Single Microtubules
  • 09:58Conclusion

Summary

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La cinesina mitotica bidirezionale-5 Cin8 si accumula in ammassi che si dividono e si fondono durante la loro motilità. L'accumulo negli ammassi cambia anche la velocità e la direzionalità di Cin8. Qui viene descritto un protocollo per saggi di motilità con Cin8-GFP purificato e analisi delle proprietà mobili di singole molecole e cluster di Cin8.

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Keywords: Kinesin-5 Cin8Bidirectional Motor ProteinSingle-molecule Motility AssaySaccharomyces CerevisiaeGFP-type Full-length Cin8Protein PurificationNuclear ProteinsFluorescent Particles

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