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Chapters
- 00:04Introduction
- 01:18Animal Surgery
- 03:26Hepatocyte Isolation
- 04:54Electroporation and Cell Culture
- 07:46Results: Generating Electroporation-Assisted CRISPR-Cas9 Edits in Freshly Isolated Mouse Hepatocytes
- 09:06Conclusion
Questo protocollo descrive le tecniche per isolare gli epatociti primari di topo dal fegato e l'elettroporazione di CRISPR-Cas9 come ribonucleoproteine e mRNA per interrompere un gene bersaglio terapeutico associato a una malattia metabolica ereditaria del fegato. I metodi descritti determinano un'elevata vitalità e alti livelli di modificazione genica dopo l'elettroporazione.
