Presentert her er en protokoll for fremstilling og bufferkalibrering av celleekstrakter fra eksonuklease V knockout-stammer av Escherichia coli BL21 Rosetta2 (ΔrecBCD og ΔrecB). Dette er en rask, enkel og direkte tilnærming for ekspresjon i cellefrie proteinsyntesesystemer ved hjelp av lineære DNA-maler.