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कुल आंतरिक प्रतिबिंब प्रतिदीप्ति (टीआईआरएफ) माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके लिपिड बाइलेयर में पार्श्व गतिशीलता और आयन चैनल गतिविधि की एकल-अणु इमेजिंग
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Single-Molecule Imaging of Lateral Mobility and Ion Channel Activity in Lipid Bilayers using Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscopy
DOI:

08:55 min

February 17, 2023

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:43Preparation of Lipids and Agarose Hydrogel
  • 01:33PMMA Chamber Assembly and Lipid Monolayer Formation
  • 03:06Preparation of Lipid-Coated Aqueous Droplets in Hexadecane/Silicone Oil Solution
  • 04:17Preparation and Imaging of Single Ion Channels in DIB Membranes
  • 06:49Results: Isolation of TOM-CC and Correlation of Channel Activity with Lateral Mobility of TOM-CC
  • 08:18Conclusion

Summary

자동 번역

यह प्रोटोकॉल बताता है कि व्यक्तिगत आयन चैनलों को ट्रैक करने और समर्थित लिपिड झिल्ली में उनकी गतिविधि निर्धारित करने के लिए टीआईआरएफ माइक्रोस्कोपी का उपयोग कैसे करें, जिससे पार्श्व झिल्ली आंदोलन और चैनल फ़ंक्शन के बीच परस्पर क्रिया को परिभाषित किया जा सके। यह वर्णन करता है कि झिल्ली कैसे तैयार करें, डेटा रिकॉर्ड करें और परिणामों का विश्लेषण करें।

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