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결합된 Cre-LoxP, CRISPR-Cas9 및 아데노 관련 바이러스 단일 가이드 RNA 시스템을 사용한 갈색 지방 특이적 녹아웃 마우스 생성
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JoVE 신문 생물학
Generation of Brown Fat-Specific Knockout Mice Using a Combined Cre-LoxP, CRISPR-Cas9, and Adeno-Associated Virus Single-Guide RNA System
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결합된 Cre-LoxP, CRISPR-Cas9 및 아데노 관련 바이러스 단일 가이드 RNA 시스템을 사용한 갈색 지방 특이적 녹아웃 마우스 생성

DOI:
10.3791/65083-v

•

03:58 min

•

March 24, 2023

•

, ,
1Section on Integrative Physiology and Metabolism, Research Division, Joslin Diabetes Center,Harvard Medical School

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:55Surgery for Adeno‐Associated Virus (AAV) Injection into the Brown Adipose Tissue (BAT) in Mice
  • 02:41Results: Identifying the Potential Flaws Leading to Unsuccessful Injection
  • 03:18Conclusion

Summary

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이 프로토콜에서는 결합된 Cre-LoxP, CRISPR-Cas9 및 아데노 관련 바이러스(AAV) 단일 가이드 RNA(sgRNA) 시스템을 활용하여 갈색 지방 조직(BAT) 특이적 녹아웃 마우스를 생성하는 기술 절차를 설명합니다. 설명된 단계에는 sgRNA의 설계, AAV-sgRNA 입자의 준비 및 BAT 로브에 AAV의 미세 주입이 포함됩니다.

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