Application de la coloration des mitochondries vivantes dans le tri cellulaire pour purifier les hépatocytes dérivés de cellules souches pluripotentes induites par l’homme
December 1st, 2023
Les hépatocytes dérivés de cellules souches pluripotentes peuvent être purifiés par tri cellulaire, en utilisant une combinaison de coloration de la molécule d’adhésion des cellules leucocytaires activées (ALCAM, également connue sous le nom de CD166).
Le champ d’application de notre recherche est de purifier les hépatocytes dérivés de cellules souches pluripotentes induites par l’homme, en utilisant sans modification génétique. Nous visons à aborder la question du risque tumorigène associé aux cellules indifférenciées, parmi celles différenciées des cellules iPS humaines. L’un des défis expérimentaux actuels est la faible pureté des cellules, en raison du stockage mécanique du tri.
Nous développons une nouvelle méthode de purification, qui utilise les caractéristiques métaboliques uniques des hépatocytes, pour une purification à grande échelle. Une méthode de tri non cellulaire pour les cellules progénitrices hépatiques ne peut pas obtenir d’hépatocytes purs. Un autre pour les hépatocytes matures ne peut traiter qu’une petite fraction des hépatocytes, en raison de l’expression limitée de la protéine marqueur.
En revanche, notre approche permet d’obtenir des hépatocytes à différents niveaux de maturation avec une eve plus élevée. Les hépatocytes humains dérivés de cellules iPS sont extrêmement immatures et présentent une expression plus réduite des macro-hépatocytes après purification. Notre objectif futur est d’améliorer la modulation des hépatocytes à l’aide de la technologie organoïdale et des progrès quotidiens de la médecine régénérative et de la découverte de médicaments.
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Aperçu
Cette étude traite de la purification des hépatocytes dérivés de cellules souches pluripotentes induites humaines en utilisant une nouvelle méthode de tri cellulaire, évitant les modifications génétiques. La recherche met l'accent sur le dépassement des défis tels que la faible viabilité cellulaire pendant le tri et vise à obtenir un meilleur rendement d'hépatocytes matures pour des applications en médecine régénérative et dans la découverte de médicaments.
Composantes clés de l'étude
Domaine de recherche
- Biologie des cellules souches
- Différenciation des cellules hépatiques
- Technologies de tri cellulaire
Contexte
- Les cellules souches pluripotentes ont un potentiel en médecine régénérative.
- Les cellules résiduelles non différenciées présentent des risques tumorigènes.
- Les méthodes actuelles manquent d'efficacité pour obtenir des hépatocytes purs.
Méthodes utilisées
- Tri cellulaire activé par fluorescence (FACS)
- Cellules souches pluripotentes induites humaines
- Techniques de viabilité cellulaire et de coloration
Résultats principaux
- La méthode a réussi à obtenir des hépatocytes matures avec une pureté élevée (97%).
- La viabilité cellulaire a été améliorée, résolvant les problèmes de stress mécanique associés au tri.
- Des populations pures de cellules de type hépatocyte ont démontré une morphologie caractéristique.
Conclusions
- Cette étude démontre l'efficacité d'une nouvelle méthode de tri pour obtenir des hépatocytes purs à partir de cellules souches.
- Les résultats sont pertinents pour améliorer les stratégies de médecine régénérative et les efforts de découverte de médicaments.
Questions fréquemment posées
Chapters in this video
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Introduction
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Hepatic Differentiation of Human‐Induced Pluripotent Stem Cells in 2D Cultures
3:52
Cell Preparation for Purification of Human‐Induced Pluripotent Stem Cells‐Derived Hepatocytes
6:44
Fluorescence&‐Activated Cell Sorting of Hepatocytes Derived from Human Induced Pluripotent Stem Cells
