Polymerase Chain Reaction and Dot-Blot Hybridization for <i>Leptospira</i> Detection in Water Samples

Eduardo Delgadillo-Tellez; Beatriz Zavaleta-Villa; Daniel Atilano-L&#243;pez; Rigoberto Hern&#225;ndez-Castro; Ang&#233;lica Olivo-D&#237;az; Erika Margarita Carrillo-Casas

doi:10.3791/65435

Dot-Blot Assay for Detection of Leptospira DNA in Water Samples

June 14, 2024

Reazione a catena della polimerasi e ibridazione dot-blot per la rilevazione di leptospira in campioni d'acqua

00:32 min

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Amplificazione del DNA di Leptospira e suo trasferimento sulla membrana mediante un apparato dot-blot

01:53 min

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Fissazione DNA-membrana e ibridazione della sonda per il rilevamento di leptospira in campioni d'acqua

01:29 min

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Visualizzazione degli ibridi di DNA utilizzando la chemiluminescenza per il rilevamento di leptospira in campioni d'acqua

02:15 min

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Eduardo Delgadillo-Tellez, Beatriz Zavaleta-Villa, Daniel Atilano-López, Rigoberto Hernández-Castro, Angélica Olivo-Díaz, Erika Margarita Carrillo-Casas

¹Department of Molecular Biology and Histocompatibility,General Hospital “Dr. Manuel Gea González”, ²Diagnostic Laboratory-Bacteriology, Leptospira Section, Department of Microbiology and Immunology, Veterinary Medicine Faculty,UNAM, ³Department of Ecology of Pathogens,General Hospital “Dr. Manuel Gea González”

Summary

In questo studio, è stata progettata un’applicazione di dot-blot per rilevare Leptospira dai tre cladi principali nei campioni d’acqua. Questo metodo consente l’identificazione di quantità minime di DNA specificamente bersaglio di una sonda marcata con digossigenina, facilmente rilevabili da un anticorpo anti-digossigenina. Questo approccio è uno strumento prezioso e soddisfacente ai fini dello screening.