酵母細胞からミトコンドリアの精製
Summary
我々は、酵母からのミトコンドリアの精製のための迅速かつ効果的な方法を説明します<em>サッカロマイセスセレビシエ</em>。このメソッドは、他の細胞小器官による汚染の本質的に自由であり、それらの精製後、構造と機能の整合性を維持する純粋なミトコンドリアの高収量を可能にします。
Abstract
ミトコンドリアは、真核生物、非光合成細胞における好気的代謝の間にATPの生産の主なサイトです。<sup> 1</sup>。これらの複雑な細胞小器官もアポトーシス細胞死の重要な役割を果たして<sup> 2</sup>、細胞の生存<sup> 3</sup>、哺乳類の開発<sup> 4</sup>、ニューロンの発達と機能<sup> 4</sup>、細胞内シグナル伝達<sup> 5</sup>、および寿命調節<sup> 6</sup>。ミトコンドリアによって制御されるこれらの複雑な生物学的プロセスについての我々の理解は、その形態、それらのタンパク質と脂質組成、彼らのDNAの完全性、およびそれらの数多くの重要な機能を評価するための堅牢な方法に依存しています。出芽酵母<em>サッカロマイセスセレビシエ</em>、注釈付きのゲノムと明確に定義されたプロテオームとの遺伝的および生化学的に操作可能な単細胞真核生物は、ミトコンドリアの本質的な生物学的機能の根底にある分子細胞メカニズムを研究するための貴重なモデルです。このような種類の勉強のために、それは高純度のミトコンドリアを持つことが重要です。ここでは、酵母ミトコンドリアの精製のための迅速かつ効果的な方法の詳細な説明を提示する。このメソッドは、他の細胞小器官による汚染の本質的に自由であり、それらの精製後、構造と機能の整合性を維持する高純度のミトコンドリアの分離が可能になります。この方法で精製したミトコンドリアは、本質的なミトコンドリアのプロセスの無細胞再構成に適しており、ミトコンドリアの構造と機能、ミトコンドリアプロテオームとlipidome、およびミトコンドリアDNAの解析に使用することができます。
Protocol
Discussion
このメソッドは、酵母細胞から純粋なミトコンドリアの高収量を可能にします。この方法で精製したミトコンドリアは、他の小器官で、本質的に汚染の自由であり、その精製後、構造と機能の整合性を保持。本質的なミトコンドリアのプロセスの無細胞再構成に適しているミトコンドリアに記載の方法利回り。これらの高純度のミトコンドリアは、ミトコンドリアの構造と機能、ミトコンド?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作品は、CIHRとカナダのNSERCからの補助金によって支えられている。 VITはCIHR新調査官とゲノミクスのコンコルディア大学のリサーチチェア、細胞生物学と高齢化です。
Referências
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