אנו מציגים עקרונות של מדידות חמצן על ידי מרווה זרחני ועיצוב סקירה של porphyrin מבוססי nanosensors הדנדריטים הדמיה חמצן במערכות ביולוגיות.
Abstract
מדידת חמצן על ידי מרווה זרחני [1, 2] מורכב מהשלבים הבאים: 1) בדיקה מועבר לתוך המדיום של עניין (למשל דם או נוזל interstitial); 2) את האובייקט מואר עם אור באורך גל מתאים כדי להלהיב בדיקה למצב שלישיה שלה; 3) זרחני הנפלט נאסף, ואת כמובן הזמן שלו הוא ניתח להניב את חייו זרחני, אשר מומר ריכוז החמצן (או הלחץ החלקי, ת.ד.<sub> 2</sub>). החללית אסור באינטראקציה עם הסביבה הביולוגית ובמקרים מסוימים להיות 4) מופרשים מן המדיום עם סיום המדידה. כל אחד משלבים אלה מטילה דרישות על עיצוב המולקולרי של בדיקות זרחני, המהווים מרכיב רק פולשני של פרוטוקול המדידה. כאן אנו סוקרים את העיצוב של nanosensors זרחני הדנדריטים למדידות חמצן במערכות ביולוגיות. הבדיקות כוללות Pt או Pd porphyrin מבוססי polyarylglycine (AG) dendrimers, שונה שולי עם פוליאתילן גליקול (PEG של) שאריות. עבור עירור שני הפוטונים יעיל, טרמיני של dendrimers עשוי להיות שונה עם שני הפוטונים chromophores האנטנה, אשר ללכוד את האנרגיה עירור וערוץ אותו ליבות שלישיה של בדיקות באמצעות intramolecular סריג (פורסטר תהודה העברת אנרגיה). אנו מתארים את המאפיינים photophysical המפתח של בדיקות כיול להציג פרוטוקולים מפורטים.
Protocol
1. תיאור כללי של פרוטוקול המדידה חמצן (סעיף זה אין כל פעולה, אך הוא חיוני להבנת שאר הנייר. זה יכול להיות מצולם, למשל, רצף של כמה שקופיות נקודת חשמל, מלווה את קולו). 1.1) בדיקה מועבר לתוך המדיום של עני?…
Acknowledgements
תמיכה של מענקים EB007279 ו HL081273 מארה"ב NIH היא הודתה בהכרת תודה.
Sinks, L. E., Roussakis, E., Esipova, T. V., Vinogradov, S. A. Synthesis and Calibration of Phosphorescent Nanoprobes for Oxygen Imaging in Biological Systems. J. Vis. Exp. (37), e1731, doi:10.3791/1731 (2010).