生体系における酸素イメージング用燐光ナノプローブの合成とキャリブレーション
Summary
我々は、リン光消光と生体系における酸素のイメージングのためのポルフィリン系樹状ナノセンサーの見直しの設計によって酸素測定の原理を提示する。
Abstract
リン光消光による酸素の測定[1、2]次の手順で構成されています：1）プローブは、関心のある媒体（例えば血液または間質液）に配信されます、2）オブジェクトは、励起するために適切な波長の光で照らされているその三重項状態へのプローブ、3）放射される燐光が収集され、その時間のコースは酸素濃度（または分圧に変換される燐光寿命を、得るために分析され、PO<sub> 2</sub>）。プローブは、生物学的環境と相互作用してはならず、いくつかのケースでは、測定終了時に培地から排泄される）4になるために。これらの各手順は、測定プロトコルの唯一の侵襲的なコンポーネントを構成する燐光プローブの分子設計上の要件を課している。ここでは、生体系における酸素の測定のための樹状燐光ナノセンサーの設計を見直す。プローブは、ポリエチレングリコール（PEGの）残基と末梢変更、PtまたはPdポルフィリン系polyarylglycine（AG）デンドリマーで構成されています。効果的二光子励起の場合は、デンドリマーの末端は、励起エネルギーを捕捉し、分子内（フェルスター共鳴エネルギー移動）FRETを経由してプローブのトリプレットコアに、それをチャンネル2光子アンテナの発色団、と変更されることがあります。我々は、プローブと現在のキャリブレーションの詳細なプロトコルの主要な光物理的性質を記述する。
Protocol
1。酸素の測定プロトコルの一般的な説明 （このセクションでは、任意のアクションを持っていますが、紙の残りを理解する上で重要ですしていません。これは、音声を伴う、いくつかのパワーポイントのスライドの順序として、例えば、撮影することができます。） プローブが関心の媒体に配信される1.1）、例えば、動物の血液または間質液に注入…
Acknowledgements
NIH、米国からの補助金EB007279とHL081273のサポートは感謝しています。
Materials
| Abbreviation | Full name |
| NMP | N-methylpyrrolidinone |
| TFA | trifluoroacetic acid |
| DIPEA | diisopropylethylamine |
| HBTU | 2-(1H-benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate |
| DMSO | dimethylsulfoxide |
| CDMT | CDMT=1-chloro-3,5-dimethoxytriazine |
| NMM | NMM=N-methylmorfoline |
Referências
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Tags
Phosphorescent NanoprobesOxygen ImagingBiological SystemsPhosphorescence QuenchingProbe DeliveryTriplet StatePhosphorescence LifetimeOxygen ConcentrationMolecular DesignDendritic Phosphorescent NanosensorsPt Or Pd Porphyrin-based Polyarylglycine DendrimersPolyethylene Glycol ResiduesTwo-photon ExcitationAntenna ChromophoresIntramolecular FRETPhotophysical Properties
Citar este artigo
Sinks, L. E., Roussakis, E., Esipova, T. V., Vinogradov, S. A. Synthesis and Calibration of Phosphorescent Nanoprobes for Oxygen Imaging in Biological Systems. J. Vis. Exp. (37), e1731, doi:10.3791/1731 (2010).