マウス卵母細胞の検索
Summary
このプロトコルは、マウスの卵管から卵母細胞や初期段階の受精卵を抽出する手法を示しています。 infindibulumを識別し、それに平滑末端の針を挿入する機能が正しく手順を実行するために不可欠です。
Abstract
日付に、唯一の研究はほとんどPeromyscus胚発生や生殖生物学の成功した操作を報告している。一緒にPeromyscus遺伝子ストックセンター（http://stkctr.biol.sc.edu）と、我々はこのシステムを開発するために必要な顕著な違いが予想されています。主な目標は、卵母細胞/初期胚の取得を最適化してきました。
Protocol
胚/卵検索胚/卵母細胞の取得に先立って、KSOMが37℃CO 2インキュベーターとFHMに配置され、少なくとも2時間は-20℃から解凍する必要があります。 three凹面浅い井戸を含むガラス皿は、インキュベーターのKSOMの家降下するために使用されます。脱水を防ぐために、KSOMと皿は、底部に水を持っている蓋付き容器内に配置されています。この装置は、鉱物油を使用せずに蒸発を防ぎ?…
Discussion
この記事では、排卵誘発（過排卵）Peromyscusから卵母細胞の取得を示しています。排卵の使用は、（のような自然の発情周期とは対照的に）ため、はるかに大きい結果の数値に共通です。しかし、注意が排卵して培養を誘導するために使用されるホルモンの両方が影響を与えることがあるとして、そのような卵母細胞/胚を利用した結果の解釈には注意が必要です。
発情が確認されたとき、女性はeuthenize…
Acknowledgements
私は彼の助け、忍耐および知識のためにPeromyscus遺伝子ストックセンターからマイクデューイに感謝いたします。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Flushing needle | Tool | Zephyrtronics | ZT5-130-L | 30 gauge blunt |
| Forceps (2) | Tool | Roboz | RS-5060 | |
| Peromyscus | Animal | Peromyscus Genetic Stock Center | ||
| Scissors | Tool | Roboz | RS-5880 | |
| FHM HEPES Buffered Media | Reagent | Specialty Media | MR-025-d | |
| KSOM Embryo Culture Medium (5×10 ml) | Reagent | Specialty Media | MR-020P-5F | |
| Mouth Pipette | Tool | Pulled from glass capillaries and attached to rubber tubing | ||
| Oocyte holding dish | Tool | Glass container with concave divets |
Citar este artigo
Duselis, A. R., Vrana, P. B. Retrieval of Mouse Oocytes. J. Vis. Exp. (3), e185, doi:10.3791/185 (2007).