אור ספוט Assay: שיטה לחקור התנהגות פוטוטאקטית Drosophila

Published: April 30, 2023

Abstract

מקור: שמש, י., ואח ‘. אור ספוט מבוסס Asssay לניתוח של דרוסופילה Larval Phototaxis. ג’יי ויס אקספ. (2019).

זחלי דרוזופילה רגישים לאור ומגיבים לשינויים באור שמסביב. סרטון זה מתאר בדיקה הבדוקה את יכולתם להימנע מאור, הנקראת בדיקת נקודת האור. הפרוטוקול המוצג מדגים כיצד להגדיר את התסעפות עם נורית אור כחול ומראה כיצד לתעד את התנהגות החיה בתגובה למפגש האור.

Protocol

טקסט פרוטוקול זה הוא קטע מתוך שמש ואח ‘, אור ספוט מבוסס Assay לניתוח של דרוזופילה Larval Phototaxis, J. Vis. Exp. (2019). 1. הגדרת מערכת ההדמיה מהדקים מצלמת אינטרנט ברזולוציה גבוהה עם קליפ ברזל, בגובה של כ-10 ס”מ מעל נקודת האור בשולחן העבודה (איור 1). כוונן א?…

Representative Results

איור 1: הגדרה ניסיונית. (A)ייצוג סכמטי של ההגדרה עבור המזחלת המהירה מבוססת כתמי האור. הקווים הכחולים מייצגים את נתיבי האור הנראה המשמשים כגירוי חזותי, והקווים האדומים מייצגים את הנתיבים של אור אינפרא אדום. החצים מציינים את כיו?…

Materials

850 nm ± 3 nm infrared-light-generating LED Thorlabs, USA PM100A Compatible Sensors: Photodiode and Thermal
Optical Power Rangea: 100 pW to 200 W
Available Sensor Wavelength Rangea: 185 nm-25 μm Display Refresh Rate: 20 Hz
Bandwidth: DC-100 kHz
Photodiode Sensor Rangeb: 50 nA-5 mA
Thermopile Sensor Rangeb: 1 mV-1 V
AC to DC converter Thorlabs, USA S120VC Aperture Size: Ø9.5 mm
Wavelength Range: 200-1100 nm
Power Range: 50 nW-50 mW
Detector Type: Si Photodiode (UV Extended)
Linearity: ±0.5%
Measurement Uncertaintyc: ±3% (440-980 nm), ±5% (280-439 nm), ±7% (200-279 nm, 981-1100 nm)
band-pass filter Thorlabs, USA DC2100 LED Current Range: 0-2 A
LED Current Resolution: 1 mA
LED Current Accuracy: ±20 mA
LED Forward Voltage: 24 V
Modulation Frequency Range: 0-100 kHz Sine Wave
Modulation: Arbitrary
Collimated LED blue light ELP, China USBFHD01M Max. Resolution: 1920×1080
F6.0 mm
Sensor: 1/2.7" CMOS OV2710
Compact power meter console Ocean Optics, USA USB2000+(RAD) Dimensions: 89.1 mm x 63.3 mm x 34.4 mm
Weight: 190 g
Detector: Sony ILX511B (2048-element linear silicon CCD array)
Wavelength range: 200-850 nm
Integration time: 1 ms – 65 seconds (20 seconds typical)
Dynamic range: 8.5 x 10^7 (system); 1300:1 for a single acquisition
Signal-to-noise ratio: 250:1 (full signal)
Dark noise: 50 RMS counts
Grating: 2 (250 – 800 nm)
Slit: SLIT-50
Detector collection lens: L2
Order-sorting: OFLV-200-850
Optical resolution: ~2.0 nm FWHM
Stray light: <0.05% at 600 nm; <0.10% at 435 nm
Fiber optic connector: SMA 905 to 0.22 numerical aperture single-strand fiber
High-Power LED Driver Minhongshi, China MHS-48XY Working voltage: DC12V
Central wavelength: 850nm
high-resolution web camera Thorlabs, USA MWWHL4 Color: Warm White
Correlated Color Temperature: 3000 K
Test Current for Typical LED Power: 1000 mA
Maximum Current (CW): 1000 mA
Bandwidth (FWHM): N/A
Electrical Power: 3000 mW
Viewing Angle (Full Angle): 120°
Emitter Size: 1 mm x 1 mm
Typical Lifetime: >50 000 h
Operating Temperature (Non-Condensing): 0 to 40 °C
Storage Temperature: -40 to 70 °C
Risk Groupa: RG1 – Low Risk Group
LED Warm White Mega-9, China BP850/22K Ø25.4(+0~-0.1) mm
Bandwidth: 22±3nm
Peak transmittance:80%
Central wavelength: 850nm±3nm
Spectrometer Noel Danjou Amcap9.22 AMCap is a still and video capture application with advanced preview and recording features.
It is a Desktop application designed for computers running Windows 7 SP1 or later.
Most Video-for-Windowsand DirectShow-compatible devices are supported whether they are cheap webcams or advanced video capture cards.
Standard photodiode power sensor Super Dragon, China YGY-122000 Input: AC 100-240V~50/60Hz 0.8A
Output: DC 12V 2A
Thermal power sensor Thorlabs, USA M470L3-C1 Color: Blue
Nominal Wavelengtha: 470 nm
Bandwidth (FWHM): 25 nm
Maximum Current (CW): 1000 mA
Forward Voltage: 3.2 V
Electrical Power (Max): 3200 mW
Emitter Size: 1 mm x 1 mm
Typical Lifetime: 100 000 h
Operating Temperature (Non-Condensing): 0 to 40 °C
Storage Temperature: -40 to 70 °C
Risk Groupb: RG2 – Moderate Risk Group
Thermal power sensor Thorlabs, USA S401C Wavelength range: 190 nm-20 μm
Optical power range:10 μW-1 W(3 Wb)
Input aperture size: Ø10 mm
Active detector area: 10 mm x 10 mm
Max optical power density: 500 W/cm2 (Avg.)
Linearity: ±0.5%

Play Video

Citar este artigo
Light Spot Assay: A Method to Investigate Drosophila Phototactic Behavior. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20144, doi: (2023).

View Video